阿尔茨海默症相关基因的克隆和细胞模型的建立

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阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)是患病率最高的老年性神经系统疾病,临床以记忆力、感觉能力、判断力、思维能力、运动能力、情感反应等降低为主。构建阿尔茨海默症的细胞模型对研究其病因、病理过程以及筛选防治阿尔茨海默病的新药具有重要作用。本研究使用RT-PCR的方法从人神经细胞中克隆了多个AD相关基因。在此基础上用pcDNA3.1真核表达载体经脂质体转染U251细胞、G418筛选后获得了APPsw(Lys595Asn,Met596Leu)和野生型BACE1转染的稳定表达细胞株。基因组DNA PCR、RT-PCR和Western blot结果表明目的基因转染成功并在mRNA和蛋白质水平稳定表达,APPsw蛋白和BACE1蛋白表达对U251细胞形态无明显影响,APPsw(Lys595Asn,Met596Leu)转染后APP蛋白和Abeta的表达量与对照组相比明显增多,BACE1转染组的Abeta产量明显增多。本研究结果将为以后深入研究阿尔茨海默症分子机制和药物筛选奠定实验和物质基础。
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