慢性吸入低浓度七氟烷对雄性小鼠生殖系统功能的影响

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目的:探讨慢性吸入低浓度七氟烷对雄性小鼠生殖系统功能的影响。 方法:40只健康性成熟ICR雄性小鼠(60日龄)被随机分为4组,每组10只,其中3个实验组分别静式吸入30ppm、100ppm或300ppm七氟烷(以医用瓶装压缩空气为载气),对照组同等条件下仅给予医用压缩空气。3个实验组动物均每天连续吸入不同浓度的七氟烷各2小时,每周连续吸入5天,持续吸入8周。8周后称重处死各组小鼠,取双侧睾丸和附睾称重,计算脏器系数;双侧附睾制作精子悬液,分析附睾的精子常规;一侧睾丸制作匀浆,采用全自动生化分析仪检测睾丸组织乳酸脱氢酶(LDH)及乳酸脱氢酶同工酶-X(lacticdehydrogenase-X,LDH-X)的活性;另一侧睾丸用10%甲醛或3%戊二醛固定,分别观察睾丸组织结构及电镜超微结构的变化。 结果: l、睾丸组织LDH及LDH-X活性:①三个实验组小鼠睾丸LDH活性随吸入七氟烷浓度增加呈现下降趋势,但与对照组比较均没有显著性差异(P>0.05)。②300ppm七氟烷组睾丸LDH-X活性[(359.19±51.71)U/g蛋白]明显低于对照组[(445.03±110.54)U/g蛋白],有显著性差异(P<0.05)。30ppm七氟烷组[(414.45±55.20)U/g蛋白]和100ppm七氟烷组[(397.92±92.12)U/g蛋白]睾丸LDH-X活性与对照组比较,均没有显著性差异(P>0.05)。 2、精子的常规分析:①300ppm七氟烷组精子畸形率为(31.34±1.67)%,明显高于对照组[(27.34±2.80)%],有显著性差异(P<0.05)。30ppm七氟烷组[(29.20±1.69)%]和100ppm七氟烷组[(29.26±3.80)%]精子畸形率与对照组比较,均没有显著性差异(p>0.05)。②三个实验组的精子计数与对照组相比较,均没有显著性差异(P>0.05)。③300ppm七氟烷组的精子活动率为(40.82±4.64)%,明显低于对照组[(47.76±6.80)%],有显著性差异(P<0.05)。30ppm七氟烷组[(46.63±5.80)%]和100ppm七氟烷组[(44.79±6.10)%]的精子活动率与对照组比较,均没有显著性差异(p>0.05)。 3、组织结构和超微结构:①三个实验组小鼠睾丸光镜组织结构未见明显改变。②30ppm七氟烷组和100ppm七氟烷组小鼠睾丸超微结构未见明显改变。300ppm七氟烷组出现精子尾部线粒体的超微结构改变,表现为形态大小不一,分布不均;部分出现肿胀,电子密度降低;板状峭减少,灶性空化。小鼠睾丸生精上皮变薄,各个发育分阶段的生精细胞明显减少,有些区域见生精细胞之间间隙扩大,生精细胞内细胞器有不同程度肿胀,甚至有部分生精细胞坏死,其核溶解。 结论:在本实验条件下,慢性吸入30ppm七氟烷或100ppm七氟烷对各项观察指标均没有明显影响,只有300ppm七氟烷引起小鼠睾丸LDH-X活性降低、精子活动率下降、精子畸形率增加及精子尾部线粒体的超微结构改变。实验结果表明慢性吸入浓度≤100ppm七氟烷对雄性小鼠的生殖系统功能没有明显影响,慢性吸入300ppm七氟烷对雄性小鼠的生殖功能有不良影响。本研究提示≤100ppm七氟烷(相当于手术室环境)可能是一安全范围。
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