靶向超声造影促进反义基因转染的体外研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kumufengchun
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目的:探讨半乳糖化多聚赖氨酸(G-PLL)耦联超声造影剂微泡及反义基因对肝癌基因的靶向抑制作用。   方法:合成荧光素标记的半乳糖基化多聚赖氨酸,将其与超声微泡造影剂及c-myc反义寡核苷酸(ASODN)耦联,并结合超声辐照,作用于表达c-myc基因的不同的肿瘤细胞株进行体外效应研究:人肝癌株SMMC-7721,人肺癌株A-549。高倍显微镜下观察细胞形态学改变;荧光显微镜下观察耦合物与细胞结合情况。RT-PCR检测不同细胞株、不同处理组c-myc基因的表达情况。   结果:合成的半乳糖化多聚赖氨酸,乳糖与多聚赖氨酸的摩尔比约为24:1,产物的平均分子量约为48000。转染后48h,高倍显微镜下显示多数肝癌细胞呈凋亡改变。荧光显微镜下显示人肝癌细胞表面大量荧光物质聚集,人肺癌细胞表面未见明显荧光物质聚集。RT-PCR证实:经超声辐照,耦联物作用后的人肝癌及肺癌细胞c-myc基因表达量均有降低,G-PLL耦联造影剂微泡及反义基因组对肝癌细胞c-myc基因表达有明显抑制作用。   结论:本实验成功合成了半乳糖化多聚赖氨酸。超声辐照下,G-PLL耦联超声造影剂微泡及反义基因可有效增强反义基因对c-myc基因表达的抑制作用,对肝癌细胞有靶向性抑制作用。
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