利用合成多肽制备兔多克隆抗体

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人类基因组计划完成后,功能基因组学成为主要研究方向,而抗体在基因的结构与功能研究中具有十分重要的作用,制备高效价的抗体是示踪新基因的表达和研究新基因功能的首要前提。单克隆抗体虽然特异性好,但其制备复杂费时,兔多克隆抗体的制备则简单、快速,便于科研工作的有效开展。 目的:通过以合成多肽为抗原来制备兔多克隆抗体,并优化实验条件,为今后实验室多克隆抗体制备实现产业化建立初步基础。 方法:本研究以生物信息学软件来分析蛋白序列选择抗原表位后,通过Fmoc法固相合成相应的多肽,经过液相色谱纯化及质谱仪鉴定合成正确后,与KLH蛋白偶联免疫新西兰雄兔,多次加强免疫后获得血清,并进行ELISA或Western Blot检测。 结果:成功合成并纯化了43条多肽,并在免疫后能够得到所需多克隆抗体。 结论:以合成多肽制备兔多克隆抗体可在本实验室独立完成,结合实验室实际条件,归纳总结了完整的多克隆抗体制备流程,为今后实验室抗体制备的产业化建立了一定基础。
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