山葡萄(Vitis amurensis Rupr.)是起源于我国东北和内蒙古东北部等地的特色果树,是葡萄属植物中最抗寒的种类,而且对多种真菌性病害具有较强抗性,山葡萄的深入研究对于葡萄病害防治和抗寒有着重要的意义。野生山葡萄为雌雄异株,两性花极为罕见。山葡萄性别分化的研究对山葡萄的优良性状机理的探索及山葡萄分子辅助育种具有重要意义。1.本研究以山葡萄‘左山一’ב043’杂交F1代189株单株为试材,采用测序技术结合集群分离分析法(Bulked Segregation Analysis,BSA)及Indel标记与SNP分型技术,进行山葡萄性别位点的精细定位和定位区间内基因的统计,实现了山葡萄性别位点的精细定位,将性别位点定位在了遗传距离为4c M,物理距离约为80kb的两个SNP标记之间,在此区间共有10个已知功能的基因。研究结果对今后深入挖掘山葡萄性别决定基因奠定了坚实的基础,对葡萄育种中的性别辅助选择具有重要的现实意义。2.以山葡萄雄株‘043’性别转换前后的花蕾为试材开展了转录组学研究,筛选与性别分化相关的基因,基于转录组测序的WGCNA分析,筛选得到了6个与山葡萄性别分化相关的差异表达基因,6个基因分别为1个腺嘌呤磷酸核糖基转移酶基因(adenine phosphoribosyltransferase 3,APT3)、1个玉米素合成相关基因、1个参与植物激素信号转导基因、3个与植物激素合成相关基因。采用半定量及定量PCR等技术明确了这些基因的表达模式。APT3基因和玉米素合成相关基因在雄株性别转换前表达量极低,而在雄株性别转换后,表达量显著增加;其余4个基因在雄株性别转换前后表达量变化趋势相近,但性别转换后的表达量明显高于性别转换前的表达量。该研究结果为今后系统地开展与山葡萄性别分化相关的RNA组学、蛋白质组学乃至多组学联合分析奠定了基础。