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肾小球是肾脏滤过过程中的一个重要单位，血液中的小分子代谢产物可由肾小球无选择地滤过至肾小囊，形成原尿，有用的大分子物质则被保留，从而维持机体内环境的稳定。肾小球毛细血管的滤过屏障由三层构成：具有窗孔的内皮细胞，肾小球基底膜(GBM)，高度分化的脏层上皮细胞(足细胞)及覆盖于GBM表面的足细胞足突。富含肌动蛋白的足细胞足突通过紧邻GBM的裂孔隔膜(slit diaphragm)相互连接。 近几年有关足细胞相关蛋白及其结构与功能的研究结果显示，裂孔隔膜和肌动蛋白细胞骨架在维持肾小球滤过屏障功能完整性中的重要作用，这将有助于进一步加深我们对蛋白尿和肾病综合征的认识。 CD2AP是新近发现的一种特异性表达于足细胞的胞浆蛋白。CD2AP基因敲除小鼠生后不久即死于大量蛋白尿，提示了CD2AP在肾小球蛋白尿发生中的重要作用。 为了进一步了解CD2AP在蛋白尿发生机制中的作用，我们进行了下列两部分研究。 第一部分：CD2AP在肾病大鼠模型中的表达及意义 目的：观察CD2-associated protein(CD2AP)在大鼠氨基核苷肾病模型肾小球中的表达变化及其意义。 方法：通过建立大鼠氨基核苷肾病模型，采用免疫组织化学、RT-PCR、蛋白质印迹技术观察CD2AP在不同时间点肾病模型大鼠肾小球中的表达和分布变化，采用荧光技术检测肾小球肌动蛋白微丝(F-actin)的变化。 结果：(1)肾小球足细胞CD2AP的表达在肾病模型建立的早期即有下调；在大鼠肾病模型蛋白尿的高峰期，CD2AP的表达明显下降；在肾病模型大鼠的疾病恢复期，CD2AP的表达逐步恢复正常。(2)肾小球足细胞CD2AP表达量的变化与肾病模型大鼠24小时尿蛋白定量的变化存在着负相关。(3)在大鼠肾病模型蛋白尿的高峰期，肾小南京医科大学硕士学位论文球F一actin含量明显下降。结论:(1)C DZAP在蛋白尿的发生机制中有着重要的地位。(2)CDZAP可能是判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。第二部分:CDZAP对细胞骨架蛋白的影响目的:观察CDZAP反义寡核普酸对CDZAP mRN.A和蛋白表达的影响，以及其对细胞骨架蛋白的影响。方法:CDZAP反义寡核普酸转染I正K293细胞24小时后，通过Rl’- PCR、W匕stem blot技术检测CDZAP mRNA和蛋白表达变化，采用荧光技术观察细胞骨架蛋白的变化。结果:(1) CDZAP反义寡核普酸可有效地阻断其mRNA和蛋白的表达。(2)CDZAP反义寡核普酸可引起细胞骨架蛋白F一actin含量明显下降。结论:CDZAP对细胞骨架蛋白F一actin的稳定有着重要作用。