【摘 要】
：
研究背景:免疫炎症反应贯穿了缺血性卒中发生发展的整个过程,是卒中进展、卒中后脑损伤及脑功能修复的重要调控因素。CD8+T细胞可通过细胞毒性作用杀伤靶细胞,在抗原特异性细胞免疫中发挥重要作用。缺血性卒中后,CD8+T细胞可越过破坏的血脑屏障浸润至脑实质内并加重脑损伤,但其作用的具体机制仍不明确。FasL表达于CD8+T细胞表面,在外周,CD8+T细胞可通过FasL使靶细胞发生凋亡,但近年来的研究发现
论文部分内容阅读
研究背景:免疫炎症反应贯穿了缺血性卒中发生发展的整个过程,是卒中进展、卒中后脑损伤及脑功能修复的重要调控因素。CD8+T细胞可通过细胞毒性作用杀伤靶细胞,在抗原特异性细胞免疫中发挥重要作用。缺血性卒中后,CD8+T细胞可越过破坏的血脑屏障浸润至脑实质内并加重脑损伤,但其作用的具体机制仍不明确。FasL表达于CD8+T细胞表面,在外周,CD8+T细胞可通过FasL使靶细胞发生凋亡,但近年来的研究发现FasL同样具有促炎效应,抑制FasL能够明显减轻缺血性卒中后T细胞相关免疫炎症反应的发生。在本论文中,我们探讨了 FasL是否能够调控脑缺血后CD8+T细胞的功能,并明确了 FasL介导的CD8+T细胞对神经元的杀伤作用,及对促炎型小胶质细胞的活化效应。此外,我们还进一步探索了 FasL调控CD8+T细胞功能的分子机制。研究方法:在体内实验部分,我们对野生型小鼠（WT小鼠）及FasL突变小鼠（gld小鼠）行一侧大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,于再灌注后不同时间点评估小鼠脑梗死体积及神经行为学功能,同时利用流式细胞术检测缺血侧半球CD8+T细胞的浸润数量及功能;磁珠分选法提取WT小鼠与gld小鼠CD8+T细胞并分别回输至缺乏成熟T细胞的Rag1-/小鼠体内,行MCAO并于术后3天评估小鼠脑梗死体积与神经行为学功能,采用q-PCR检测梗死侧半球促炎因子的表达水平,免疫荧光染色评估梗死灶周围神经元存活及胶质细胞活化情况。体外实验部分,将WT小鼠及gld小鼠来源的CD8+T细胞与OGD后神经元体外共培养,MTT法及LDH释放法检测神经元死亡率;同时将不同基因型CD8+T细胞与小胶质细胞共培养,q-PCR比较两组小胶质细胞极化水平的差异;在部分实验中,利用FasL中和抗体及Fas中和抗体分别处理CD8+T细胞与小胶质细胞,共培后利用q-PCR及流式细胞术评估CD8+T细胞功能及小胶质细胞极化情况。最后,体外直接刺激CD8+T细胞FasL,利用流式细胞术检测MAPK信号通路关键蛋白磷酸化情况;同时使用PD98059、SB203580及SP600125抑制MAPK信号通路活化,采用流式细胞术、q-PCR及CBA法评估CD8+T细胞功能。结果:1)与WT小鼠相比,MCAO后不同时间点gld小鼠脑梗死体积明显降低,神经行为学功能明显改善。2)流式细胞术结果显示,与WT小鼠相比,MCAO后不同时间点gld小鼠梗死侧半球CD8+T细胞数量并无明显差异,但活化分子及毒性细胞因子的表达显著降低。3)与WT组相比,回输gld小鼠来源的CD8+T细胞后,Rag1-/-小鼠MCAO后脑梗死体积、神经功能缺损程度、缺血侧半球促炎因子表达及小胶质细胞活化程度均明显降低,而梗死灶周围神经元的存活率显著增高。4)与WT组相比,gld小鼠来源的CD8+T细胞对OGD后神经元的杀伤作用明显减轻。5)与WT组相比,gld小鼠来源的CD8+T细胞显著减轻了小胶质细胞的M1型极化程度。阻断CD8+T细胞FasL或阻断小胶质细胞Fas后,CD8+T细胞毒性显著降低。6)直接刺激CD8+T细胞FasL后,p-ERK1/2、p-JNK及p-p38的表达水平明显增高,且CD8+T细胞毒性显著增强;抑制MAPK信号通路可阻断FasL介导的CD8+T细胞促炎效应。结论:1)FasL突变可减少缺血性卒中后脑梗死体积,并有效缓解小鼠神经功能缺损;FasL突变可明显减轻缺血侧半球CD8+T细胞的毒性;同时,FasL突变可减轻梗死灶周围CD8+T细胞诱导的神经元死亡及小胶质细胞活化,进一步抑制脑内免疫炎症反应。2)缺血性卒中后,CD8+T细胞通过FasL杀伤神经元,并与小胶质细胞Fas结合,促进小胶质细胞M1型极化及自身毒性增强,两种细胞共同作用进一步加重神经元死亡。3)FasL可通过活化MAPK信号转导通路诱导CD8+T细胞毒性增强。
其他文献
随着各国工业化进程的加快,人类对水资源的非航行利用急剧增加,世界淡水资源日益匮乏,水资源的加速利用又带来了严重的水污染问题,水质的逐渐恶化又进一步加剧了水短缺问题,各国围绕跨界河流水资源利用与保护的摩擦、冲突和争端不断发生,如何公平、合理、最佳利用跨界河流水资源,缓解淡水匮乏危机,避免跨界水冲突,促进跨界河流利用与保护合作是目前国际社会共同面临的课题。中国的跨界河流数量众多,分布广泛,中国在这些跨
网络描述了节点和节点之间的关系,可用来定义复杂的数据关系,适用于建立大数据环境下的数据模型,例如社交网络、引文网络、词网络、知识图谱、化学物质网络和蛋白质网络等。网络表示学习的目标是从网络中提取出具有表征力的特征,以供后续的知识发现和知识挖掘任务使用。近年来,随着大数据的普及和深度学习技术的进步,网络表示学习的理论和方法取得了突破性的发展。然而,在网络表示学习的各个环节中,现有研究在信息的利用能力
本文主要研究日本新马克思主义学者铃木亨（Tohru Suzuki,1919-）的劳存思想。铃木亨的“劳存”即“劳动性实存”,是他的自创概念,指将马克思的“劳动”与存在主义统一并超越。铃木亨认为,在马克思的后期思想、尤其在《资本论》中蕴含着存在主义倾向,但是要将马克思主义与存在主义真正地内在统一起来并超越的话,其首要前提就是两者具有内在的“亲缘性”。同时,他还认为,在马克思本人思想中其实还是存在一个
转喻传统上一直被认为是一种修辞手段,这种修辞研究传统起源于亚里士多德,延续到20世纪的中西修辞学。1980年后,转喻进入了认知语言学的研究领域,在认知语言学家们看来不总是修辞性用法,而是一种普遍的思维方式。90年代后,语用学也开始关注转喻的使用与理解,主要关注新颖性指称转喻的界定与理解问题。然而,无论是认知语言学还是语用学,对转喻的理解过程的细节挖掘还不够。近年来,开始有一些研究从认知语用学的视角
近几十年来,在硅（Si）基金属-氧化物-半导体场效应晶体管（MOSFET）尺寸等比例缩小的推动下,集成电路性能得到了蓬勃发展。进入深亚微米技术节点后,传统的等比例缩小使得器件特性出现了很多问题,例如栅极漏电增大、短沟道效应等。自此,应变硅技术、高介电常数栅氧化层/金属栅极（high-k/metalgate）技术、绝缘层上硅（SOI）技术、鳍型栅（FinFET）技术、高迁移率新沟道材料、新机理晶体管
初中物理是学生建立物理知识体系雏形,建立基本物理思维观念的重要课程,其在时代与教育协同发展驱动下,逐渐脱离基础知识传导层次,而是借由多元化、现代化物理课堂,为学生提供多种学习发展渠道,以此促使其在物理学习过程中实现全面发展。多媒体技术作为综合性与灵活性较强的高效教学工具,其在初中物理教学中的应用途径,成为相关教师当下重点关注的问题。初中物理已经具备一定的难度,不仅需要牢记相关的概念,还要加强对原理
伴随着政治经济体制改革和经济快速发展,数以亿计的居民离开户籍所在地涌入到陌生城市中,却由于各种制度限制难以获得本地城镇户籍,在城镇社会空间内形成与本地城镇居民相比的特殊群体——外来人口群体,外来人口的城市融入成为日益广泛关注的学术议题。其中,本地城镇居民对外来人口持何种态度,是情感歧视还是心理接纳,对外来人口的城市融入具有重要意义。既往研究主要从社会结构位置、社会制度、社会资本等单一静态因素上寻找
工作目的:探索转化生长因子β1（TGFβ1）及其信号通路在人膀胱癌细胞中的作用,研究重点是膀胱癌细胞的上皮间质转化（EMT）、迁移侵袭和干性能力的改变。在作用机制方面,主要探索长链非编码RNAs（lncRNAs）在TGFβ1信号通路中起到的调节作用,为膀胱癌的诊断和治疗提供新的靶点。研究方法:用5nM重组人TGFβ1和/或20nM TGFβ信号通路抑制剂SB-431542处理三株膀胱癌细胞,563
研究背景镁基金属具有可降解性,接近人体骨组织的力学性能和良好的生物相容性等优势,有望成为新一代骨组织修复生物医用材料。然而镁在生理溶液中不耐腐蚀,其过快的降解速率会导致力学性能的快速衰减,同时伴随降解微环境中pH值升高,镁离子和氢气大量释放。上述因素不利于骨组织的修复,加大手术失败的风险,限制了镁基金属在临床的应用。此外,大量的动物实验已经表明镁可以有效促进周围新生骨再生,但是作为降解产物之一的镁
山姆·谢泼德（1943-）于20世纪60年代在外外百老汇崭露头角,创作的戏剧作品题材广泛、风格独特,为美国戏剧注入了新鲜活力。作为流行文化蓬勃发展的见证者和参与者,谢泼德在创作中融入大量视觉要素。不少批评者注意到了其戏剧强烈的视觉震撼力以及剧中丰富的视觉意象,少数涉及对图像的研究主要局限于图像与真实之间关系的探讨,忽视了图像的复杂性以及图像对于推进剧情发展和呈现人物生存状态的意义。然而,对图像的运