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胡椒碱(Piperine,PIP)是常见的辛香料活性成分之一,目前主要作为常用的食材和辛香料食品添加剂应用于酿酒和食品制造业。胡椒碱药理学活性广泛,如:镇痛、抗炎、抗惊厥、抗肿瘤、抗氧化、降血脂等,但由于其存在溶解度低、生物利用度差等问题,故而在临床领域的应用受到了极大的阻碍。为此,本课题将纳米胶束与脂质体这两种新型纳米给药系统分别运用于胡椒碱,以达到增溶、增加稳定性与提高生物利用度的目的,从而提高药物的治疗指数,减少药物的毒副作用,并且对两种增溶手段进行比较,为其在今后临床的广泛应用提供借鉴。全文主要分为以下五个部分:第一章综述本章综述主要分为两个部分,第一部分介绍了辛香料的研究概况及其活性成分增溶技术的研究进展,围绕包合/包覆技术、固体分散技术、微乳、脂质体以及纳米技术等五个方面进行了综述;第二部分阐述了辛香料难溶性活性成分——胡椒碱的理化性质、药理作用以及目前的制剂研究现状。对辛香料现代制剂技术及其应用研究的综述为后续相关实验的开展奠定了理论基础。第二章处方前研究本章建立了高效液相色谱法(HPLC)测定胡椒碱体外样品中药物含量的方法,并对其进行方法学验证。此方法专属性良好,线性范围0.5-100μg/mL(n=3,R2=0.9997);定量限为14 ng,检测限为5 ng;样品的日内及日间精密度均小于2%。测定了胡椒碱在不同种溶出介质中的平衡溶解度,结果显示胡椒碱在水中的平衡溶解度最低,仅有20.21μg/mL,在pH 1.2 HCl溶液与pH 7.4的磷酸盐缓冲液中的溶解度虽略微高一点,但也只有36.12μg/mL与33.69μg/mL,这些结果都表明胡椒碱难溶于水,为后续的制剂开发等提供了参考依据。第三章胡椒碱纳米胶束的制备及其体外评价本章首先利用薄膜分散法制备了胡椒碱载药的磷脂-胆酸钠-聚维酮三元混合纳米胶束,并结合单因素与正交设计法对其处方进行优化,得到最佳处方为:胡椒碱投药量5 mg,药脂比为1:80,胆酸钠用量为0.3 g,PVP K-30用量为0.4 g。其次,对按最佳处方制备的胡椒碱纳米胶束进行了各项体外性质评价,结果显示胡椒碱纳米胶束呈类球形均匀分布、粒径较小,平均粒径约为13.08±0.58nm,zeta电位为-22.33±2.73mv,包封率高达89.81±1.53%。初步稳定性试验结果表明胡椒碱纳米胶束在60°c以下,30天内具有良好的热稳定性。体外释药结果表明,在三种不同溶出介质中,胡椒碱原料药在72h内的累积释药率仅有60%左右,而胡椒碱纳米胶束在72h内的释药度均大于95%,明显高于原料药,说明纳米胶束对胡椒碱起到了良好的增溶作用。第四章胡椒碱纳米脂质体的制备及其体外评价本章采用磷脂、胆固醇为主要载体,同时加入胆酸钠和肉豆蔻酸异丙酯,以薄膜分散-水合法制备了胡椒碱载药的多相脂质体,以单因素试验及正交优化设计对其进行处方筛选,得到最佳处方为:药脂比为1:30,磷脂与胆固醇的比为6:1,ipm用量为0.5g,胆酸钠用量为0.4g。对按照最佳处方制得的胡椒碱纳米脂质体进行物理化学表征,结果发现,胡椒碱纳米脂质体呈类球形分布均匀,平均粒径为86.85±1.4nm,zeta电位为-41.4±3.1mv,包封率可达91.53±0.89%,且30天内60°c以下稳定性较好。胡椒碱体外释放结果表明,所制备的纳米脂质体能够显著增大胡椒碱的体外释药量,72h在水中最高可达94.03%。第五章胡椒碱及其纳米制剂大鼠肠吸收特性及体内药动学考察本章以sd大鼠作为实验动物模型,建立了高效液相色谱法(hplc)测定胡椒碱体内样品中药物含量的方法,并对其进行方法学验证。此方法专属性良好,线性范围50-2500ng/ml(n=6,r2=0.9971);样品的日内及日间精密度均小于4%;样品回收率在98.77%-101.21%之间,rsd均<3%;检测限为7ng/ml,定量限为18ng/ml。以自制的胡椒碱纳米胶束及脂质体作为受试制剂,以胡椒碱原料药作为对照,对其进行大鼠在体肠吸收特性以及体内药物动力学的考察,结果显示胡椒碱纳米胶束及脂质体均能显著提高药物在大鼠体内的肠吸收以及生物利用度。大鼠在体肠吸收实验结果发现不同浓度的胡椒碱在小肠的三个肠段(十二指肠、空肠、回肠)均有吸收,但吸收存在显著的差异,结果表明回肠为胡椒碱的最佳吸收部位,空肠及十二指肠次之;药物浓度在10μg/ml时的回肠吸收百分率最大,但也仅有5.621%,说明胡椒碱原料药在大鼠小肠的吸收较差;药物浓度为5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml的胡椒碱在回肠的吸收速率常数ka值分别为(0.0531±0.059)/h,(0.0598±0.055)/h及(0.0407±0.026)/h且数值间均具有显著性差异,因而可根据其吸收速率常数的变化趋势推测胡椒碱在大鼠小肠的吸收可能是被动扩散与主动转运同时存在。此外,还发现相对于胡椒碱原料药,不同浓度的胡椒碱纳米胶束及脂质体在小肠不同肠段的吸收均有明显的提升,说明胡椒碱纳米制剂可显著提高大鼠小肠对胡椒碱的吸收。体内药动学研究结果表明,相对于胡椒碱原料药(946.40 ng/mL),48 h内胡椒碱纳米胶束及脂质体的Cmax分别增加到1368.93ng/mL和2588.99 ng/m L,分别提高了1.45和2.74倍;胡椒碱纳米胶束及脂质体组的AUC0-48h分别为20336.41和51473.85h·ng/mL,约为胡椒碱原料药组(14157.01 h·ng/m L)的1.44和3.64倍;t1/2、MRT显著延长,纳米胶束及脂质体口服给药的半衰期t1/2为原料药的1.17-1.60倍,MRT为原料药的1.06-1.34倍,说明两种纳米制剂均可显著提高胡椒碱的口服吸收,提高生物利用度,但纳米脂质体的体内吸收效果较纳米胶束更为明显,并且这一结果与胡椒碱大鼠在体肠吸收特性考察的结果一致。此外,胡椒碱原料药及其纳米制剂的体内吸收分数与其在双蒸水、pH 1.2 HCl溶液以及pH 7.4磷酸盐缓冲液三种介质中的体外释药均具有良好的体内外相关性。