病毒性出血热(Viral hemorrhagic fevers，VHFs)是一类由病毒引起的，临床症状主要表现在发热和出血的一类疾病。这类疾病通常伴有休克等症状，病死率高，危害严重。引起病毒性出血热主要包括数十种病毒的五个不同病毒科:布尼亚病毒科、沙粒病毒科、丝状病毒科、黄病毒科及弹状病毒科。至今，在我国流行的病毒性出血热主要有肾综合征出血热、新疆出血热、登革出血热及2010年在我国发现的一种新型布尼亚病毒——发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus，SFTSV)等。目前对病毒性出血热的治疗方法有限，除个别病毒外，大部分没有有效的疫苗可进行防治。多数感染者早期没有明显的临床特征，类似于流感。因此建立快速、灵敏的实验室检测方法对于病毒性出血热疾病的治疗和控制具有重要的意义。　　目前，实验室主要是通过病毒分离、PCR、ELISA等方法对病毒性出血热进行诊断。病毒分离被认为是诊断病毒感染的金标准，但其病毒分离实验过程耗时较长，而其他的检测方法因其无法同时进行多重检测，且需大量的临床样本和人力操作等缺陷。目前，本实验室已初步建立病毒性出血热多重荧光定量RT-PCR检测方法和悬浮芯片技术诊断病毒性出血热多重血清学方法。为实现病毒性出血热核酸的多重检测及解决临床早期机体内抗体的存在问题，本实验的目的是建立基于液相芯片技术对病毒性出血热核酸进行多重检测的方法。　　液相芯片技术是20世纪70年代中期由美国Luminex公司开发的一种高通量检测技术平台，它可以实现在一个反应体系中同时完成100种不同分析物的定性、定量检测分析，具有快速、操作简单、高通量、高灵敏度、高信噪比、节省标本及时间等优点。目前国内外研究较多的是应用于蛋白质的检测，如细胞因子的活动水平检测、肿瘤标记物、激素水平的检测等。　　发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒是我国首先发现的具有重要公共卫生意义的新型布尼亚病毒，能够引起以发热伴血小板和白细胞减少以及消化道症状为主要临床表现的病毒性疾病。作为一种新发现的全新病原体，SFTSV的复制、传播与致病等方面的机制均需进一步阐释，不同的细胞嗜性有可能是导致宿主发病、多器官受损乃至死亡的重要原因之一，研究SFTSV对体外培养的不同种类细胞的嗜性及对宿主细胞的影响，对开展相关基础研究，了解其致病机制及其防控具有重要作用。　　本研究主要分为两大部分:　　第一部分:通过NCBI网站下载31种病毒性出血热病毒的全基因序列，经软件分析，在各出血热病毒基因保守区域设计特异性引物和探针，用软件对引物和探针进行初步分析。利用体外转录得到的RNA模板进行多重PCR扩增后，与标记探针的微球杂交，进行液相芯片检测。初步建立了基于液相芯片技术检测病毒性出血热核酸的方法，评价引物探针对检测的特异性和灵敏度，利用部分临床血清样本对方法的实用性进行初步评价。　　第二部分:通过不同感染复数(multiplicity of infection)的SFTSV感染Vero等10种不同组织来源的细胞株，采用双抗体夹心ELISA法和间接免疫荧光实验(IFA)检测不同时间点的细胞培养上清和细胞内病毒抗原表达水平，绘制病毒动态生长曲线，并观察记录细胞病变（Cytopathic effect）情况，确定SFTSV细胞嗜性。结果显示SFTSV具有广嗜性，可以感染肝、肺、肾、子宫和卵巢等多器官以及免疫系统等来源的细胞系，但不能感染T和B淋巴细胞源细胞系，为S FTSV相关基础研究提供重要线索。