【摘 要】
:
植物与昆虫的互作关系是个长期进化的过程,虫害给农业生产带来巨大损失。本研究以甘蓝型油菜(Brassica napus)为例,研究了不同环境条件和遗传背景下外源基因的表达与效用,同时利
论文部分内容阅读
植物与昆虫的互作关系是个长期进化的过程,虫害给农业生产带来巨大损失。本研究以甘蓝型油菜(Brassica napus)为例,研究了不同环境条件和遗传背景下外源基因的表达与效用,同时利用蛋白质组技术,研究了虫害损伤模拟条件下植物可能存在的内源抗性机制。甘蓝型油菜中转入了人工合成的Bt(Bacillus thuringiensis)杀虫基因,能使植物产生抗虫蛋白抵御虫害。我们在湖北湖南两个实验点进行了大田实验,按植株生长发育的4个不同时期从转基因植株的叶片上采样,研究抗虫蛋白在植物体内的表达动态。植株顶部第三片展开叶的Bt毒蛋白浓度在结荚期前随植物生长而不断增加,而在结荚期出现或增或减的现象。采样叶片的可溶性总蛋白浓度含量一直呈增加的趋势,直到结荚以后出现含量的明显降低。同时,收集了转基因油菜与湘油15号在田间自然杂交形成的杂交后代种子用于栽培,用GFP仪检测杂交后代的绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein),并用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测并确认带有转基因的杂交植株。为了检测带有转基因的杂交后代油菜中Bt毒蛋白的杀虫效率,用对Bt毒蛋白敏感的试虫品系——初孵棉铃虫幼虫(Helicoverpaarmigera)进行杀虫活性检测实验。结果表明,携带Bt基因的杂交湘油及其转基因亲本对试虫的体重增长量均产生了负面影响,可以推断在调查取样的植株生长发育阶段,转基因杂交后代与其转基因亲本植株的杀虫效率没有显著差异。转基因植物及其杂交后代中抗虫蛋白的持续表达及田间带有转基因的自播植物的出现会使害虫产生耐受抗性的潜在可能性增加。
出相对于人为增加的抗虫基因,植物在长期对抗昆虫的过程中也进化形成了自我防御机制,能够产生特异的抗性蛋白来应对昆虫的取食。本研究用机械损伤模拟害虫取食,对比了油菜受到物理损伤前后可溶性总蛋白的含量变化并试图通过蛋白质组学技术来检测可能发生变化的蛋白质。Bradford定量测定发现,同一植株同一叶片损伤前后可溶性总蛋白含量差异显著,损伤后蛋白表达量显著增高。蛋白质组双向凝胶电泳及其差异分析显示,损伤前后有8个蛋白质点发生明显的上调或下调。选择其中2个差异蛋白点经过MALDI-TOF质谱鉴定,它们分别是Rubisco小亚基前体以及果糖-1,6-二磷酸醛缩酶和粪卟啉-3-氧化酶的混合物,这些蛋白质在其他植物的抗逆研究中也有报道,它们可能在油菜叶片应答机械损伤过程中对维持植物的生理功能也有重要作用。
其他文献
磷脂是生命的基础物质,是人类及动植物组织细胞膜的重要组成成分,是人体正常代谢与健康生存不可缺少的物质同时磷脂酰胆碱也是植物生长发育的重要代谢物,也是植物细胞膜主要脂质组分。大豆磷脂酰甲基转移酶(GmPLMT)存在于大豆磷脂酰胆碱合成途径中,是卵磷脂合成的关键酶。为了探明大豆中GmPLMT基因具体功能,为大豆种质的改良提供备选基因,本研究从吉育72号大豆中克隆了得到了GmPLMT基因,构建植物表达载
外来种紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng.)对我国西南地区生态系统的危害已长达50~60年之久,我国于20世纪70年代开展紫茎泽兰的研究,但目前仍然没有能力将其限制在一个可
克隆植物存在于自然界几乎所有类型生态系统,在群落和生态系统中起着重要作用。作为植物群落的重要组分,克隆植物势必深刻地影响群落的结构和功能。揭示克隆植物在不同类型生态
PKS(PKS,protein kinases)也称CIPK(CIPK,CBL-interacting protein kinases),编码丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,与类钙调磷酸酶B蛋白(CBL,Calcineurin B-like protein)相互作用,在植物多种逆境信号转导中发挥重要的调控作用。为了对大豆GmPKS4基因进行初步鉴定,分析了该基因在大豆不同组织的表达情况;构建了植物表达载体
糖尿病(Diabetes Mellius,DM)是由多种因素引起的以高血糖为特征的代谢性疾病。胰岛β细胞的功能异常和数量减少引起的胰岛素分泌不足是糖尿病发病的主要原因。1,25-(OH)2D3(
蚯蚓纤溶酶(earthworm fibrinolytic enzymes,EFE)是一类在蚯蚓体内分离到的具有纤溶蛋白作用和激活纤溶酶原作用的蛋白质,具有抗凝、纤溶和溶栓作用,可以作为溶栓药物治疗因血栓
磷脂酰甘油(PG)是光系统I(PSI)中唯一的磷脂,也是PSI重要的组成部分。在本工作中,我们通过改变PSI中PG的含量(体外重组至PG脂质体或专一性磷脂酶降解),研究了PG对PSI的调控作用
棉花黄萎病是一种危害严重的世界性病害,目前已遍布世界30多个国家和地区,已成为严重影响世界各主产棉国棉花高产稳产的主要障碍。为了控制棉花黄萎病,减少其带来的经济损失,
种子贮藏稳定性对于种质资源的长期保存具有重要意义,目前关于种子贮藏的最新理论为玻璃态理论,该理论认为种子的玻璃化有利于种子的长期贮藏。当种子处于玻璃态时,玻璃化物质的
摘要:在小学数学教学中,使学生学好数学,培养起学习兴趣,养成良好的学习习惯,对于提高全民族的素质,培养有理想、有道德、有文化、有纪律的社会主义公民,具有十分重要的意义。 关键词:小学数学;学习习惯;培养;措施在小学数学教学中,使学生学好数学,培养起学习兴趣,养成良好的学习习惯,对于提高全民族的素质,培养有理想、有道德、有文化、有纪律的社会主义公民,具有十分重要的意义。良好的学习习惯,是学习知识、