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β-榄香烯是从中药温莪术（Curcuma wenyujin Chen et C. Ling）的干燥根茎中提取分离得到的倍半萜烯类化合物。β-榄香烯是具有特异性细胞毒性的广谱抗癌药物，具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗病毒、提高机体免疫力、抑制血小板凝集、改善微循环等作用。其现有制剂，乳注射剂、口服乳等，在临床上主要用于治疗癌性胸腹水、肝癌、肺癌、脑瘤等，疗效确切。近几年来，β-榄香烯已经成为抗癌药物的一个研究热点，也是中药西制的一个典范。β-榄香烯不溶于水，口服生物利用度极低，腹腔注射生物利用度也仅有8.49％，静脉注射可迅速被机体消除。β-榄香烯制剂在临床应用中的一个严重的副作用是血管刺激性较大，静脉炎发生率达30％。基于以上原因，本论文的主要研究目的就是通过脂质体新剂型解决β-榄香烯血管刺激性、提高其生物利用度、延长其静脉注射给药时的体内半衰期，进而靶向肿瘤，提高抗肿瘤疗效。为此我们设计了三种不同类型的脂质体，即β-榄香烯普通脂质体（CLE）、长循环脂质体（PLE）和热敏长循环脂质体（TLLE）。本论文主要包括以下内容：1．β-榄香烯的分离和理化性质测定。温莪术挥发油中分离提取得到了β-榄香烯，并对其理化性质，如油水分配系数、折光率、旋光度、在不同溶剂中的溶解度进行了测定，同时考察了β-榄香烯在乙醇溶液中的稳定性。结果，β-榄香烯油水分配系数为199.5，折光率为1.4932，比旋度为-16.359°，在各种有机溶剂中溶解度均较大。在40℃、60℃加热的条件下，β-榄香烯含量均有所下降。2．CLE、PLE、TLLE的制备及制剂性质考察。乙醇注入法为CLE、PLE的制备方法，在单因素考察和正交试验基础上优化CLE处方。结果表明，脂药比、磷脂浓度、水相介质种类对CLE包封率影响较大，其他因素对包封率影响较小。最后确定CLE的最优处方，得到了包封率较高（92.3％）的CLE；通过考察DSPE-PEG2000的用量，在CLE最优处方的基础上，确定了PLE的处方（包封率95.2％）；以相变温度和包封率为指标，确定了薄膜分散法制备TLLE的处方，该处方相变温度为41.8℃，符合临床热疗的要求，包封率为87.9％；对CLE、PLE和TLLE的理化性质及制剂稳定性进行了考察。结果，CLE、PLE和TLLE为小单室脂质体，CLE、PLE较TLLE稳定，4℃、25℃下12个月内稳定性较好。3．CLE、PLE和TLLE的药物动力学和组织分布的研究。建立了快速、准确、简单的生物样品中p-榄香烯气相色谱分析方法。大鼠尾静脉注射50 mg／kg以上三种制剂后，与市售制剂EE相比，TLLE的t1/2、AUC（0→t）、MRT（0→t）分别为EE的3.2、4.2、2.3倍，统计学分析有显著性差异（P＜0.001）；PLE的t1/2、AUC（0→t）、MRT0→t)分别为EE的2.7、3.9、2.3倍（P＜0.001）；而与EE相比，CLE只使AUC（0→t）提高了1.5倍（P＞0.05），二者其他药动学参数间无显著性差异。药动学结果表明，PLE、TLLE均可使β-榄香烯体内循环时间延长，有长循环性；TLLE、PLE、CLE均可使β-榄香烯生物利用度得到显著提高。荷瘤小鼠尾静脉注射60mg／kg各种制剂，不同方案的组织分布结果表明，各治疗组肿瘤中药物分布由大到小的顺序为：TLLE+HT＞PLE+HT＞PLE＞CLE＞EE+HT＞EE。在热疗条件下，以EE+HT为对照，TLLE+HT有最大的肿瘤靶向性，靶向参数为2.57。在生理温度下，PLE、CLE较EE有更好的肿瘤靶向性（靶向参数分别为2.17、1.33）。TLLE、PLE在肝脾中药物分布量均降低，证明了TLLE、PLE可降低肝脾的摄取，更多地靶向肿瘤组织。尤其是TLLE有在加热部位快速释药的热敏性，使其对肿瘤组织的靶向性大大增加。另外，TLLE、PLE、CLE在脂肪中的分布均减少，有望可以克服EE在脂肪中的蓄积现象。4．CLE、PLE和TLLE药效学研究。在体外抗肿瘤试验中，以EE作为阳性对照药，用MTT试验测定了三种制剂对6种人癌细胞的半数抑制浓度。结果，细胞毒活性为PLE＞CLE≈TLLE＞EE，透射电镜对癌细胞结构的观察结果与MTT试验结果一致。体内药效学试验中，以荷瘤小鼠为动物模型，考察了不同给药方案荷瘤鼠的抑瘤率和生命延长率，结果显示，在40mg／kg剂量下，各组抑瘤效果由强至弱依次为：TLLE+HT（69％）＞PLE+HT（62％）＞CLE+HT（58％）=TLLE（58％）＞PLE（56％）＞EE+HT（51％）＞CLE（48％）＞EE（40％）＞HT（11％）。TLLE+HT组的抑瘤率高达69％。在生理体温（无热疗）条件下，各组比较时，PLE的抑瘤率较高，为56％。生命延长率实验中，生命延长百分率由大到小的顺序为PLE＞CLE＞TLLE。PLE、CLE可使荷瘤鼠存活时间延长约1倍；TLLE使荷瘤鼠存活时间延长约25.7％；EE无延长存活时间的作用。各组荷瘤鼠体重变化的结果表明，在抑瘤实验过程中荷瘤鼠的体重变化未超过正常范围，说明给药剂量比较适合，各种制剂毒副作用均较小。总之，CLE、PLE和TLLE体内外抗肿瘤效果均优于EE。5．CLE、PLE和TLLE的制剂安全性研究。CLE、PLE、TLLE均为静脉注射剂，本文对制剂的安全性从以下几个方面进行了评价。急性毒性实验考察小鼠最大耐受剂量；家兔溶血性试验考察制剂的渗透压是否合格，能否引起溶血；豚鼠的过敏试验考察制剂能否引起过敏反应；家兔的耳缘静脉刺激性试验考察制剂的血管刺激性。结果，三种制剂在制剂最大浓度和小鼠最大耐受剂量下均有良好的耐受性，无溶血现象、无过敏反应发生、对血管无刺激性，静脉给药是安全可行的。