转StBADH基因番茄的耐旱性研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huang7567802
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番茄(Solanum lycopersicum L.)是一种在世界范围内广泛栽培的重要蔬菜之一,在我国蔬菜产业中具有重要地位。干旱直接威胁着番茄植株的生长发育,导致产品品质下降,多数栽培番茄品种对干旱敏感,通过基因工程提高番茄抗胁迫的能力具有重要意义。甜菜碱是最常见也是最重要的有机渗透调节物质之一,番茄自身却不能合成甜菜碱,本研究利用农杆菌介导法将甜菜碱合成途径中的关键酶基因甜菜碱醛脱氢酶基因StBADH对番茄品种‘金棚一号’进行遗传转化,获得转基因植株,并对T1代转基因植株的耐旱性进行研究。主要研究内容如下:1.将植物表达载体pStBADH成功转入根癌农杆菌EHA105中,利用农杆菌介导法,以番茄子叶为外植体进行遗传转化。通过半叶法GUS检测最终获得1株转基因番茄植株,bar、gus以及StBADH基因PCR检测均为阳性,Southern杂交结果表明,外源基因已经整合到番茄基因组中。2.通过GUS检测、除草剂抗性检测以及PCR检测对T1代植株进行鉴定,结果27株后代番茄植株中有18株GUS组织化学染色为蓝色,叶片涂抹除草剂Basta后仍为绿色,PCR均扩增出了1518bp的特异条带,其余均为阴性,表明外源基因StBADH基因已经遗传到后代植株中并发生了分离,分离比符合孟德尔遗传定律。转基因植株在胁迫前后的BADH活性均显著高于对照,并且胁迫后的BADH活性提高了1.77倍,受到显著诱导。3.对转StBADH基因的T1代番茄植株进行干旱胁迫处理15 d后,番茄的营养生长及生殖生长均受到伤害;随着胁迫时间的延长,叶片中相对含水量下降,O·-2产生速率、H202含量、MDA含量及相对电导率均升高,生理生化代谢紊乱,但转基因植株受到的伤害显著低于对照;叶片SOD、POD、CAT和APX 4种抗氧化酶的活性及脯氨酸含量均上升,转基因植株显著高于对照。转StBADH番茄植株对干旱胁迫的耐受能力高于对照,表明通过遗传转化技术导入StBADH基因可以提高番茄的耐旱性。
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