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本文探讨了异育银鲫幼鱼对维生素K、泛酸、胆碱、维生素B12、叶酸的需求量,并选取了其中的两种促进脂肪代谢的维生素泛酸和胆碱,将其添加到高碳水化合物饲料中,利用其调节脂肪代谢的作用来平衡整个物质代谢,以探讨异育银鲫对高碳水化合物饲料的利用能力。整个研究由异育银鲫维生素需求和促脂代谢维生素在高碳水化合物饲料中的应用效果评价两大部分组成。维生素需求研究包括5个生长实验:实验一设计了7个梯度的维生素K水平饲料(0.13、2.15、3.25、6.4、12、17.2、23.2 mg/kg)以确定异育银鲫对饲料中维生素K的需求量;实验二设计了6个梯度的泛酸水平饲料(2.6、13.5、35、76.4、116、183 mg/kg)以确定异育银鲫对饲料中泛酸的需求量;实验三设计了7个梯度的胆碱水平饲料(76.1、162.6、356.4、969、1457.1、2024.4、4400.3 mg/kg)以确定异育银鲫对饲料中胆碱的需求量;实验四设计了6个不同的维生素B12水平(0、75、150、300、750、1500μg/kg)和2个处理组(0VB12+0.5%琥珀酰磺胺噻唑,0VB12+0叶酸+0.5%琥珀酰磺胺噻唑),以确定异育银鲫对饲料中维生素B12的需求量以及抗生素和叶酸对维生素B12需求的影响;实验五设计了6个不同的叶酸水平处理组(0、2.8、4.2、15.4、29.4、61.6 mg/kg)和一个处理组(0叶酸+0.5%琥珀酰磺胺噻唑),以确定异育银鲫对饲料中叶酸的需求量及抗生素对其影响。维生素在高碳水化合物饲料中的应用部分包括3个实验:实验六在高碳水化合物饲料中添加3个泛酸水平(6.7、41.0、134.0 mg/kg),以适中碳水化合物饲料为对照组,检验泛酸对异育银鲫摄食高碳水化合物饲料时脂肪代谢的调节作用;实验七在高碳水化合物饲料中添加3个胆碱水平(145、1213、4400 mg/kg),以适宜碳水化合物水平饲料为对照组,检验胆碱对异育银鲫摄食高碳水化合物饲料时脂肪代谢的调节作用;实验八通过2水平泛酸因子(0、160 mg/kg饲料)×3水平胆碱因子(0、2240、7840 mg/kg饲料)的交互设计来探讨泛酸、胆碱两种维生素对异育银鲫幼鱼摄食高碳水化合物饲料时物质代谢的共同影响及交互作用。
主要研究结果如下:
1.通过饲料效率和血液红细胞数目与饲料中维生素K水平的关系折线法分析求得异育银鲫幼鱼对饲料中维生素K的适宜需求量分别为3.73 mg/kg和6.72mg/kg饲料。
2.摄食率随着饲料中维生素K的添加显著降低(P<0.05)。特定生长率随着维生素K的添加表现出持续升高的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。饲料效率先显著升高(P<0.05)后趋于稳定(P>0.05),并且与特定生长率呈正相关关系。
3.血液红细胞数目随着饲料维生素K的添加先显著升高(P<0.05),后趋于稳定(P>0.05)。血红蛋白含量、血球容积比、血清钙含量与血液中红细胞数目表现出相似的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。肝体比、肥满度及鱼体生化组成均不受饲料维生素K水平的影响(p>0.05)。
4.通过特定生长率和饲料中泛酸水平的关系折线法分析求得异育银鲫对饲料中泛酸的适宜需求量为34.1 mg/kg。
5.特定生长率、饲料效率、蛋白质效率、肥满度均随着泛酸的添加呈现显著性地上升的趋势(P<0.05),在35 mg泛酸/kg饲料水平之后趋于稳定(P>0.05)。泛酸的添加可以显著性地提高鱼的存活率、摄食率、肝体比(P<0.05),显著降低全鱼的水分、灰分含量,提高全鱼蛋白含量(P<0.05)。肝脏中泛酸的蓄积量随着饲料中泛酸水平的增加一直增加。
6.实验期间,泛酸缺乏组异育银鲫出现明显的厌食、生长差、体瘦、高死亡率以及皮肤、鳍条组织的腐烂等症状,未发现鳃组织异常。
7.通过特定生长率和饲料中胆碱水平的关系折线法分析求得异育银鲫对饲料中胆碱的适宜需求量为1050 mg/kg饲料。
8.饲料中胆碱含量为2024.4 mg/kg时,其特定生长率高于其它各组(P<0.05)。摄食率和饲料效率不受胆碱水平的显著影响(P>0.05)。胆碱水平从6.1 mg/kg上升到2024.4 mg/kg时,蛋白储积率显著升高(P<0.05),胆碱水平继续升高到4400.3 mg/kg时,蛋白储积率显著降低(P<0.05)。血清高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇含量随着饲料中胆碱水平的增加呈显著上升的趋势(P<0.05),在胆碱含量为1457.1 mg/kg之后保持稳定(P>0.05)。
9.异育银鲫幼鱼半精制饲料中不需要额外添加维生素B12。
10.特定生长率随着饲料中维生素B12的添加而升高,但差异不显著(P>0.05)。肝体比、血液红细胞数目均不受维生素B12水平的影响。肥满度表现出显著升高的趋势,在214μg/kg时出现最大值(P<0.05)。血清尿素N有降低的趋势(P<0.05)。在基础饲料中添加抗生素对生长、摄食、饲料效率、肝体比、肥满度、血清尿素N含量、血液红细胞数目均无显著影响(P>0.05)。但是在基础饲料中扣除叶酸同时添加抗生素会显著降低特定生长率和饲料效率(P<0.05)。
11.分别根据特定生长率和饲料效率与饲料叶酸水平的关系,通过折线法分析求得异育银鲫幼鱼对饲料叶酸的适宜需求量为923-970μg/kg饲料。
12.摄食率随着饲料中叶酸含量的增加一直显著降低(P<0.05)。特定生长率随着饲料中叶酸的添加呈显著升高的趋势(P<0.05),当叶酸含量≥835 ug/kg时,SGR趋于稳定(P>0.05)。饲料效率的变化趋势与特定生长率相似,先显著升高后趋于稳定(P<0.05)。蛋白质效率、肝体指数、肥满度、血红蛋白含量、红细胞数量、血清尿素N含量均不受饲料叶酸水平的影响(P>0.05)。随着饲料中叶酸水平的增加,全鱼水分、灰分含量显著增加,粗蛋白、粗脂肪含量显著减少(P<0.05)。在不含叶酸的饲料中添加抗生素可以显著减少血液红细胞数目,显著增加血红蛋白含量、血清尿素N含量(P<0.05),摄食率和特定生长率有降低的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。
13.在饲料中泛酸、胆碱均添加到适宜水平时,异育银鲫可以耐受较高含量的饲料碳水化合物水平。
14.饲料中泛酸水平从6.7增加到41 mg/kg时,摄食率、特定生长率、饲料效率、蛋白质效率、蛋白储积率、脂肪储积率显著增加(P<0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇水平、低密度脂蛋白胆固醇水平显著升高,干物质表观消化率、蛋白表观消化率、能量表观消化率显著升高(P<0.05),全鱼水分、灰分显著下降,粗蛋白显著增加(P<0.05)。随着饲料中泛酸进一步增加,饲料效率、脂肪储积率、血清低密度脂蛋白胆固醇含量显著增加(P<0.05),脂肪表观消化率显著降低(P<0.05),其它指标均保持稳定(P>0.05)。
15.在高碳水化合物饲料中添加胆碱可以有效地调控脂肪代谢并可以有效促进生长。
16.饲料中胆碱水平从145增加到1213 mg/kg时,摄食率、肝脏苹果酸酶活性和肝体指数显著降低(P<0.05),而特定生长率、饲料效率、蛋白质效率、蛋白储积率、脂肪储积率、能量储积率和血清游离脂肪酸含量显著提高(P<0.05)。随着饲料中胆碱水平进一步提高,虽然生长保持稳定(P>0.05),但摄食率、肝体指数显著降低,饲料效率、脂肪储积率、蛋白储积率继续显著升高(P<0.05)。
17.泛酸、胆碱两种维生素对生长、饲料利用、物质代谢各指标均没有交互作用。饲料中碳水化合物升高,且泛酸水平过高时不宜添加过量胆碱,对生长不利。饲料中添加胆碱产生的影响受泛酸含量的影响。
18.同时缺乏泛酸、胆碱的实验鱼各项指标均出现最低值(P<0.05)。除了肝体指数外,所有指标都受饲料泛酸水平的显著影响(P<0.05)。在高水平泛酸组(160mg/kg饲料)添加高水平胆碱(7840 mg/kg饲料)时,特定生长率、饲料效率、蛋白质效率、蛋白储积率均显著降低(P<0.05)。在泛酸缺乏组添加高水平胆碱(7840 mg/kg饲料)可以显著降低肝体指数和成活率(P<0.05)。组织学观察发现,泛酸、胆碱同时缺乏组肝脏细胞中充满了形状规则的圆形脂肪颗粒,细胞质被挤到细胞膜的边缘,随着泛酸或胆碱的添加,脂肪颗粒均有减少的趋势。饲料中高水平胆碱的添加可以明显地减少小肠微绒毛的长度和密度。
总之,异育银鲫幼鱼对饲料维生素K、泛酸、胆碱、叶酸的最适需求量分别为3.73-6.72、34.1、1050、0.923-0.970mg/kg,异育银鲫幼鱼半精制饲料中不需要额外添加维生素B12。在高碳水化合物饲料中分别添加泛酸和胆碱都可以起到促进生长和脂肪代谢的作用,但是,泛酸含量过高的情况下过量添加胆碱不利于生长、存活、组织结构的完整性等。泛酸、胆碱两种维生素对生长、饲料利用、物质代谢各指标均没有交互作用。