辽宁省H9N2亚型禽流感分离株鉴定及抗原特性初步分析

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H9N2亚型禽流感病毒是一种低致病性禽流感,这类病毒一般不会导致禽类发病或死亡,但H9N2亚型禽流感病毒可以使患病家禽生产性能降低,严重时H9N2亚型禽流感病毒可以混合其他病毒或细菌感染,造成禽类死亡。H9N2亚型禽流感病毒会和H5、H7等其他亚型禽流感毒株之间发生基因重配,是新发流感病毒重要的基因供体病毒,H9N2亚型禽流感染人类的事件也频繁发生,所以对于H9N2亚型禽流感病毒的防控显得尤为重要。由于各类亚型的流感病毒所导致疾病的治疗和防控策略不同,建立快速的分型检测方法,对于流感的早期诊断和防控有重要意义。本论文首先建立H5、H7和H9亚型流感病毒的分型鉴定PCR方法,利用该方法检测在活禽市场采集到的禽类咽拭子、肛拭子样品,鉴定出11份H9N2亚型禽流感病毒阳性样品。对11份阳性样品进行病毒纯化、分离、增殖,将获得的H9N2病毒命名为A/Chicken/Liaoning/01/2017(H9N2)-A/Chic ken/Liaoning/11/2017(H9N2)。比对11株病毒的HA和NA序列,发现2株病毒A/C hicken/Liaoning/05/2017(H9N2)和A/Chicken/Liaoning/06/2017(H9N2)的HA蛋白在100、221、250、315位点处与其他9株病毒不同。利用H9N2亚型禽流感病毒标准血清分析11株病毒的抗原性,发现A/Chicken/Liaoning/05/2017(H9N2)和A/Chicken/Liao ning/06/2017(H9N2)2株病毒的抗原性发生较大变异,与标准血清结合的血凝抑制价低,推测HA100、221、250、315这四个位点影响了病毒的抗原性。将这2株毒株感染SPF鸡,制备高免血清,经血凝抑制实验发现,高免血清与其它9株病毒结合良好,因此这两株H9N2病毒可能成为辽宁省H9N2亚型禽流感病毒的后备疫苗株。
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