桑叶中α-葡萄糖苷酶抑制物质的提取方法及其提取物对糖尿病小鼠治疗作用的研究

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糖尿病是一种非常普遍的内分泌代谢紊乱疾病,是胰岛素分泌和利用障碍引起的以高血糖为特征的慢性疾病。糖尿病发病率逐年增长,已成为全世界的突出问题。α-葡萄糖苷酶抑制剂是一种新型的口服控制血糖的药物,目前广泛用于临床的有阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇。这类药物可有效控制糖尿病人餐后血糖的升高,从而控制病情的发展和减少糖尿病并发症的发生。桑叶是一种传统中药。已有研究表明桑叶中含有α-葡萄糖苷酶抑制物质,但是如何快速高效的获取这些成分,并且进一步获得更加有效的抑制物还有待进一步研究:利用本实验室较为成熟的α-糖苷酶抑制剂体外筛选模型,对用不同方法提取的桑叶浸膏抑制α-葡萄糖苷酶的活性进行检测,以确定获取高α-糖苷酶抑制活性成分的方法。经实验得出的最佳提取方法为:桑叶用沸水加热提取30min得到水提物,将水提物溶于水取上清液用水-乙酸乙酯萃取,得到的水相经D101大孔树脂层析,用水洗脱,水洗脱液经聚酰胺柱层析,再用水洗脱,得到的水洗脱液经G25凝胶柱层析,再用水洗脱,以50ml作为一组流份,得到S004S-2和S004S-3、S004S-5、S004S-7、S004S-10浓缩物。通过对这四个分段浸膏半数抑制浓度进行检测,结果显示它们对a-葡萄糖苷酶均有有明显抑制作用。将上述最佳提取方法得到的四个桑叶浸膏进行体内实验,通过建立四氧嘧啶导致的小鼠糖尿病模型,分别用混有一定比例浸膏和拜糖苹的饲料饲养样品组和阳性组,模拟糖苷酶抑制剂的实际使用方法进行给药,考察体外实验筛选出的桑叶浸膏对糖尿病小鼠血糖及其他生化指标的影响。发现糖尿病小鼠在经过桑叶浸膏治疗后,血糖明显下降,30天后接近正常水平,体重明显上升,同时对血脂、肾重比和脂质过氧化均有明显的改善作用。
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