目的:探索蟾毒灵对体外培养人膀胱癌T24细胞凋亡和自噬的影响,探讨蟾毒灵在干扰人膀胱癌T24细胞生长的作用机制。方法:采用人膀胱癌T24细胞株为研究对象。将不同浓度的蟾毒灵作用于膀胱癌T24细胞,采用MTT法测定蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖抑制的作用;倒置显微镜下观察细胞形态学变化;流式细胞术(flow cytometry analysis,FCM)检测蟾毒灵对膀胱癌T24细胞周期的变化;电镜下观察自噬小泡的发生;应用实时荧光定量PCR法检测自噬基因Beclin1基因mRNA表达变化。结果:MTT结果示:不同浓度华蟾素作用于T24细胞24h、48h后其IC50值分别为91.7nmol/L、20.4noml/L;蟾毒灵对膀胱癌T24细胞增殖有抑制作用。流式细胞仪检测数据示:经蟾毒灵处理过的膀胱癌,G0/G1期细胞计数较正常膀胱癌细胞明显增多,S期膀胱癌细胞记数较正常膀胱细胞则明显减少,结果说明蟾毒灵作用于膀胱癌细胞后,使部分膀胱癌细胞不能顺利进入S期,而是将膀胱癌细胞阻碍停滞在G0/G1期,最后使膀胱癌细胞的增殖受到了抑制。透视电镜下示:膀胱癌T24细胞经过蟾毒灵处理后,诱导了自噬小泡的形成。通过实时荧光定量PCR法检测自噬基因Beclin1基因mRNA表达水平显著升高。结论:蟾毒灵对体外培养的人膀胱癌T24细胞的有明显的增殖抑制作用,影响T24细胞周期,诱导该细胞自噬及凋亡,可能与自噬相关基因Beclin1水平表达增强有关。