胃癌相关miRNAs的筛选及其与胃癌发生发展的关系

来源 :兰州大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:cool_1944
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目的:筛选、鉴定胃癌相关miRNAs,研究miRNA分子在胃癌发生发展中的作用,为胃癌发病机制的研究以及未来的靶向治疗提供新的思路和理论基础,同时研究发现的miRNA还可能作为新一代特异性胃癌相关生物学标记,为胃癌的诊断、预后判效提供新的参考依据。方法:采用Agilent human miRNA (8*60K) V18.0基因芯片分析2对胃癌组织和邻近非肿瘤组织之间差异表达的miRNA,对筛选结果应用Real-time PCR方法在56例胃癌组织标本中进行验证,并结合患者临床资料(包括:年龄、性别、肿瘤大小、临床病理分期、淋巴结转移等),分析其与胃癌临床病理特征的关系;应用Real-time PCR方法对胃癌发生发展相关的]niRNAs在不同分化程度的7种胃癌细胞株及正常胃黏膜细胞株中验证,进一步探讨其在胃癌发生发展中的作用。结果:1. miRNA芯片共筛选30个胃癌明显差异表达的miRNAs,其中表达上调的14个,表达下调的16个。2.在56例胃癌手术切除标本中验证发现,初筛的14个表达上调miRNAs中有10个确认在胃癌组织中高表达;初筛的16个表达下调1niRNAs中有12个确认在胃癌组织中低表达。另外8个miRNAs的表达与胃癌无明显相关性。3. miR-551b-3p、miR-100-5p、miR-363-3p及miR-215等4个miRNAs与胃癌的分化程度、TNM分期及淋巴结转移等密切相关。4. miR-200a-3p在男性胃癌患者中表达明显高于女性患者。5. miR-429在50岁以上的胃癌患者中表达明显高于50岁以下的患者。6. miR-551b、miR-100-5p及miR-363-3p的表达在胃癌细胞中相比正常胃黏膜细胞明显下调,胃癌细胞的分化程度越差,其表达量越低。7. miR-215的表达在胃癌细胞中均高于正常胃粘膜细胞株GES-1,其表达量与胃癌细胞的分化程度之间无明显相关性。结论:1.在胃癌组织和细胞中存在众多差异表达的miRNAs分子,提示miRNAs在胃癌发生发展的过程起着重要作用。2. miR-551b-3p、miR-100-5p及miR-363-3p在胃癌组织和细胞中表达明显下调,且与胃癌的分化程度、病理分期及淋巴结转移等密切相关,提示其可能发挥抑癌基因的作用参与胃癌的发生、发展进程。3. miR-215在胃癌组织和细胞中表达明显上调,且与胃癌组织的分化程度、病理分期及淋巴结转移等密切相关,提示其可能发挥癌基因的作用参与胃癌的发生、发展进程。4. miR-200a-3p异常表达可能与胃癌发病存在性别差异相关。5. miR-429异常表达可能与胃癌发病存在年龄差异相关。6. miR-551b-3p和miR-363-3p可能是两个新发现的在胃癌浸润转移进程中起重要作用的分子。7. miR-215在胃癌组织中的特有异常表达(显著升高)具有重要的意义,其具有作为胃癌诊断标记物的潜在可能性。
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