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苹果树腐烂病是一种普遍发生于我国苹果主产区的重要病害,严重影响我国苹果产业的健康发展,随着人们对环境条件和果品要求的提高,化学防治受到越来越多的限制。内生真菌作为一种普遍存在于寄主植物中的真菌,能产生多种活性物质,越来越多的研究表明,植物内生真菌在防治植物病害方面具有很大的潜力。本论文旨在研究健康苹果树皮中内生真菌的区系及变化,筛选对苹果树腐烂病菌有抑制作用的内生真菌,为苹果树腐烂病的生物防治提供新材料。主要研究结果如下:1.采用组织分离方法从健康苹果树皮中分离内生真菌,经形态学研究和18SrDNA序列比较分析,分离到的459株内生真菌共属于17个属。包括:链格孢属(Alternaria),拟茎点霉属( Phomopsis ),茎点霉属(Phoma),盾壳霉属(Coniothyrium),枝孢属(Cladosporium),青霉属(Penicillium),镰刀菌属(Fusarium),漆斑菌属(Myrothecium),间座壳属(Diaporthe),大茎点霉属(Macrophoma),黑孢霉属(Nigrospora),曲霉属(Aspergillus),毛壳菌属(Chaetomium),毛球腔菌属(Setosphaeria),节菱孢属(Arthrinium),木霉属(Trichoderma),Clathrospora。其中Clathrospora sp.和Setosphaeria sp.是本研究新发现的内生真菌属。2.链格孢属真菌是一种普遍存在于苹果树皮中的真菌。3.通过对峙试验筛选出对苹果树腐烂病菌有拮抗作用的内生真菌,抑菌率在40%以上的共有24株,链格孢属真菌占87.5%。如果在进行对峙培养时先接种内生真菌,3天后再接腐烂病菌,供试的11株内生链格孢对腐烂病菌的抑制率均在80%以上。4.不同内生真菌的麦芽膏培养滤液对腐烂病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用差别均较大,对菌丝生长抑制率最高的为菌株Al 6(Alternaria sp),在培养滤液含量为10%时抑制率为83.76%。对孢子萌发抑制作用最强的为菌株Al 58(Alternaria sp),抑制率为82.42%。5.内生真菌产生的挥发物质对苹果树腐烂病菌菌丝生长速度和菌丝干重的影响随着内生真菌培养天数的增多而增大,对菌落直径影响最大的为培养了8天的Al 67,对腐烂病菌菌落直径的抑制率为24.41%,对菌丝干重影响最大的为培养了8天的Al 107,对腐烂病菌菌丝干重的抑制率为82.58%。6.用拮抗性内生真菌预先占位接种苹果树枝干后,能有效抑制腐烂病菌的侵入和病斑的扩展,抑制作用最强的为菌株Al 107,在田间人工接种条件下,完全抑制了腐烂病菌的侵入。