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聚合物胶束是近年来纳米给药领域中发展起来的一种新型药物载体。两亲性共聚物在水溶液中自发形成具有核壳结构的胶束,其外壳亲水,内核为由疏水嵌段组成的可以成为疏水药物储库。广义的聚合物胶束包括嵌段共聚物胶束和接枝共聚物胶束(自聚集纳米粒)。肿瘤多药耐药性(multidrug resistance, MDR)是指肿瘤细胞同时对多种化学结构和作用机制并不相同的抗癌药物产生的耐受性,在癌症治疗中,肿瘤细胞的多药耐药性是肿瘤化疗失败的主要原因之一。本研究制备MPEG-PLA/Pluronic嵌段共聚物混合胶束和胆固醇-壳聚糖(CHS-CS)接枝共聚物胶束,以多烯紫杉醇为模型药物探讨了提高其体内生物利用度并克服肿瘤细胞对抗癌药物的多药耐药性。MPEG-PLA嵌段共聚物的制备：以聚乙二醇单甲醚作为大分子引发剂,辛酸亚锡为催化剂,通过调整丙交酯的量控制共聚物的分子量,合成了一系列不同分子量的MPEG-PLA嵌段共聚物。胆固醇-壳聚糖接枝共聚物的制备：以碳二亚胺和N-羟基丁二酰胺为催化剂,以壳聚糖寡聚物和胆固醇半琥珀酸酯为原料,通过壳聚糖上的氨基和胆固醇半琥珀酸酯上的羧基发生酰化反应合成胆固醇-壳聚糖接枝共聚物。以三硝基苯磺酸法测定接枝共聚物的氨基取代度(DS)为15.3。采用共溶剂挥发法制备聚合物胶束,以粒径为指标,通过单因素考察,确定了聚合物在丙酮中的最佳浓度为150 mg／mL,以及丙酮和纯水的比例(1：20),制备得到粒径约为20～50 nm、粒度分布窄的空白MPEG-PLA聚合物胶束。以载药量和包封率为指标,筛选得到载药量较高的MPEG2-PLA2.5嵌段共聚物。以粒径和载药量为指标,考察三种不同种类、不同比例的Pluronic嵌段共聚物对MPEG-PLA/Pluronic混合胶束的粒径和多烯紫杉醇载药量的影响,并最终确定得到多烯紫杉醇载药量较高(>3%)的MPEG-PLA/Pluronic混合胶束的制备工艺和混合胶束中MPEG-PLA和Pluronic的比例(6：1,w／w)。通过动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)法考察了多烯紫杉醇MPP/Pluronic混合胶束的外观、粒径及粒度分布,结果表明此混合胶束外观为澄清透明的液体,平均粒径为20～30 nm,呈现圆整球状形态并且分布均匀。采用透析袋法考察了多烯紫杉醇的体外释药行为。结果表明多烯紫杉醇MPEG-PLA/Pluronic混合胶束中药物释放缓慢,72 h药物释放度低于60%；释放速率还和组成混合胶束的材料直接相关。采用芘(pyrene)荧光探针法测定MPEG-PLA嵌段共聚物和MPEG-PLA/Pluronic混合共聚物的临界胶束浓度(CMC),结果表明MPEG-PLA/Pluronic混合聚合物的临界胶束浓度约为4 mg／L,这说明混合胶束可能在体内稀释条件下具有更高的稳定性和保证胶束完整性的能力。多烯紫杉醇聚合物胶束的体外稀释稳定性结果表明,载药MPEG-PLA/Pluronic混合胶束的体外稀释稳定性好。细胞毒性结果表明,与MPEG-PLA胶束及市售处方Taxotere(?)相比,MPEG-PLA/Pluronic混合胶束能够显著增强多烯紫杉醇对MCF-7/ADR和KBv多药耐药细胞的细胞毒性。体外细胞摄取试验证实,与对照组相比MPEG-PLA/Pluronic混合胶束能促进多烯紫杉醇在KBv细胞中的摄取。使用激光共聚焦显微成像技术观察载有香豆素-6的不同胶束处方在KB和KBv细胞中分布和内在化程度的差异,结果表明4 h时,在KBv细胞中,MPEG-PLA/Pluronic混合胶束的细胞内在化程度显著高于MPEG-PLA胶束。建立了大鼠血浆样品中测定多烯紫杉醇含量的HPLC分析方法。大鼠静脉注射药物动力学结果表明,多烯紫杉醇MPEG-PLA/Pluronic混合胶束的体内生物利用度是市售处方Taxotere(?)的3.6倍,并延长了其在体内的循环时间(2.05 h v.s.1.04 h)。荷瘤BALB／C裸鼠体内抑制肿瘤效率试验结果表明,载药MPEG-PLA/P85混合胶束与市售处方Taxotere(?)和MPEG-PLA聚合物胶束相比,能显著提高药物对接种耐药KBv癌细胞荷瘤裸鼠的肿瘤抑制率。测定给药后荷瘤BALB／C裸鼠体重变化的结果表明,MPEG-PLA/P85混合胶束处方的全身毒性要低于市售Taxotere(?)处方的全身毒性。采用探头超声法制备空白的CHS-CS自聚集纳米粒,纳米粒为304 nm的近球形粒子,ζ电位21.3 mV。通过透析法制备包封多烯紫杉醇的CHS-CS纳米粒,载药量约为2%。CHS-CS接枝共聚物的临界聚集浓度(CAC)为0.0079 mg／mL,保证了纳米粒在稀释的条件下有较高的物理学稳定性。体外释放结果表明多烯紫杉醇CHS-CS纳米粒在pH 6.0释放介质中的释放速率大于在pH 7.4中的释放速率。细胞毒性结果表明,多烯紫杉醇CHS-CS纳米粒对KBv耐药细胞的细胞毒性高于多烯紫杉醇磷酸缓冲液。体外细胞摄取结果表明,CHS-CS纳米粒能够促进多烯紫杉醇在KBv细胞中的摄取,FITC标记的CHS-CS纳米粒细胞摄取结果也优于壳聚糖纳米粒。激光共聚焦显微成像结果表明,与FITC标记的壳聚糖纳米粒相比,CHS-CS纳米粒在KBv细胞中的内在化程度较高,CHS-CS纳米粒能够部分克服肿瘤细胞对多烯紫杉醇的多药耐药性。