在视觉形成过程中，感光细胞是通过感光色素接受光信息的。而屈光状态的发育依赖视觉，只有干扰正常的视觉环境才能引起近视。因此作为非成像视觉系统的感光色素，黑视素(MLO)可能在近视眼形成的过程中起到视觉信息传递和调控的作用。目前关于MLO在形觉剥夺性近视(FDM)和离焦性近视(LIM)及其恢复期的表达及作用如何尚未见报道。本实验的目的是探讨MLO在FDM和LIM及其恢复期在视网膜中的表达是否有改变。通过建立豚鼠形觉剥夺近视和离焦性近视及其恢复期模型，采用免疫荧光与western-blotting方法检测MLO蛋白在两种近视眼模型及其恢复期中的表达。因此本实验设计了以下内容:一.形觉剥夺性近视及其恢复期豚鼠视网膜黑视素表达的变化;二.离焦性近视及其恢复期豚鼠视网膜黑视素表达的变化。初步探讨视网膜黑视素的表达与实验性近视的关系。　　 第一部分形觉剥夺性近视及其恢复期豚鼠视网膜黑视素表达的变化　　 目的:观察在三色豚鼠形觉剥夺性近视及其恢复期视网膜黑视素表达的改变，初步探讨豚鼠视网膜黑视素的表达与形觉剥夺性近视的关系。　　 方法:实验研究。　　 第一步形觉剥夺性近视及其恢复模型的建立：以豚鼠为实验动物，进行单眼形觉剥夺建立形觉剥夺性近视动物模型以及单眼形觉剥夺后去除头套进行形觉剥夺恢复。实验前后分别采用红外偏心摄影验光仪测定屈光力，A超测定前房深度、晶状体厚度、玻璃体腔深度、眼轴长度，对数据进行综合分析，确定近视及其恢复模型的建立。　　 第二步黑视素蛋白含量的测定形觉剥夺性近视及其恢复模型：建立后颈椎脱臼处死豚鼠，取眼球进行免疫荧光实验，取视网膜进行Western-blotting实验。观察形觉剥夺性近视及形觉剥夺性近视恢复期豚鼠视网膜中黑视素表达的情况。　　 将30只3周龄三色豚鼠随机均分为形觉剥夺2周组（单眼遮盖）、形觉剥夺2周后恢复3天组、正常对照组。在形觉剥夺前、后及恢复期分别测量屈光度、玻璃体腔深度、眼轴长度，并比较实验眼、对侧眼、正常对照眼之间的差异。实验结束后于上午10-12点钟取材，用免疫组织化学及蛋白质免疫印迹法检测视网膜黑视素蛋白的表达。　　 结果:形觉剥夺形成的近视度数为（-6.40±1.08）D，与对侧眼和正常对照眼相比，组间差异有统计学意义，玻璃体腔深度、眼轴长度分别延长（0.18±0.05）mm、（0.23±0.11）mm，与对侧眼和正常对照眼相比组间差异均有统计学意义。形觉剥夺恢复3天后实验眼屈光度数恢复70％左右，与自身对照组、正常对照组相比，组间差异有统计学意义，玻璃体腔深度、眼轴长度组间比较差异无统计学意义。免疫组织化学结果显示豚鼠形觉剥夺近视发生后，实验眼视网膜黑视素表达均明显低于对侧眼，恢复期实验眼与对侧眼相比无明显差异。Western blot结果和免疫组织化学结果一致。　　 结论:形觉剥夺性近视的发生伴随有视网膜黑视素表达的降低;形觉剥夺性近视恢复期视网膜黑视素表达上升;包含黑视素视蛋白的感光节细胞可能能够感受形觉剥夺的信息;视网膜黑视素表达的降低可能参与了形觉剥夺性近视眼的形成。　　 第二部分镜片诱导性近视及其恢复期豚鼠视网膜黑视素表达的变化　　 目的:观察在三色豚鼠镜片诱导性近视及其恢复期视网膜黑视素表达的改变，初步探讨豚鼠视网膜黑视素的表达与镜片诱导性近视的关系。　　 方法:实验研究。　　 第一步镜片诱导性近视模型的建立：以豚鼠为实验动物，进行单眼镜片诱导，建立镜片诱导性近视动物模型，建立好豚鼠镜片诱导性近视模型后，去掉实验处理2天建立镜片诱导性近视恢复模型。实验前后分别采用红外偏心摄影验光仪测定屈光力，A超测定前房深度、晶状体厚度、玻璃体腔深度、眼轴长度，对数据进行综合分析，确定镜片诱导性近视及其恢复模型的建立。　　 第二步黑视素蛋白含量的测定镜片诱导性近视及其恢复模型建立：后颈椎脱臼处死豚鼠后，取眼球进行免疫荧光实验，取视网膜进行Western-blotting实验。观察镜片诱导性近视及其恢复期豚鼠视网膜中黑视素表达的情况。　　 将30只3周龄三色豚鼠随机均分为负透镜诱导3天组（单眼-4.00D透镜诱导）、负透镜诱导3天后恢复2天组、正常对照组。在透镜诱导前、后及恢复期分别测量屈光度、玻璃体腔深度、眼轴长度，并比较实验眼、对侧眼、正常对照眼之间的差异。实验结束后于上午10-12点钟取材，用免疫组织化学及蛋白质免疫印迹法检测视网膜黑视素蛋白的表达。　　 结果:透镜诱导后形成的近视度数为（-2.52±0.71）D，与对侧眼和正常对照眼相比差异有统计学意义，玻璃体腔深度、眼轴长度分别延长(0.04±0.05) mm、(0.08±0.07) mm，与对侧眼和正常对照眼相比组间差异均无统计学意义。镜片诱导恢复2天后实验眼屈光度数、玻璃体腔深度、眼轴长度与自身对照组、正常对照组相比差异均无统计学意义。免疫组织化学结果显示豚鼠透镜诱导性近视发生后，实验眼视网膜黑视素表达均明显低于对侧眼，恢复期实验眼与对侧眼相比无明显差异。Western blot结果和免疫组织化学结果一致。　　 结论:镜片诱导性近视的发生伴随有视网膜黑视素表达的降低;镜片诱导性近视恢复期视网膜黑视素表达上升;包含黑视素视蛋白的感光节细胞可能能够感受光学离焦的信息;视网膜黑视素表达的降低可能参与了镜片诱导性近视眼的形成。