目的:线粒体功能障碍和氧化应激在糖尿病和心房颤动(房颤)的发病机制中发挥重要作用,但其具体的机制尚不清楚。稳心颗粒,作为一种复方中药制剂,在临床用于治疗多种心律失常。目前研究表明稳心颗粒通过缩短动作电位时程,延长心房有效不应期和心房选择性抑制峰钠电流有效抑制房颤。本研究通过给予过氧化氢刺激心房成纤维细胞和建立2型糖尿病大鼠模型评估稳心颗粒对心房重构及线粒体功能的干预作用及其相关机制。方法:细胞实验分离1-3天新生SD大鼠心房成纤维细胞培养,分为4组:对照组,过氧化氢组,稳心颗粒1g/L组,稳心颗粒3g/L组。稳心颗粒预处理1h后,给予过氧化氢处理24h。通过DCFH-DA探针检测细胞内活性氧水平,通过JC-1探针检测细胞内线粒体膜电位水平,通过Seahorse细胞能量分析仪测定细胞内线粒体耗氧量。动物实验选取8周龄SD雄性大鼠,适应性喂养1周,随机分为3组:对照组,糖尿病组,稳心颗粒组(糖尿病 稳心颗粒)。对照组始终饲普通饮食,糖尿病组及稳心颗粒组均给予60%高脂饮食,4周后经尾静脉注射30mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病模型。糖尿病模型建成后稳心颗粒组大鼠予稳心颗粒3g/kg/d灌胃,干预8周后所有动物进行后续实验。通过心脏超声测定左心房直径(LAD)、室间隔厚度(IVS)、左心室后壁厚度(LVPW)、左心室收缩末内径(LVESD)、左心室舒张末内径(LVEDD)和E/A,评价心脏结构和功能。通过体表心电图测定心率、P波时限、PR间期、QRS时限和QT间期。通过血流动力学测定收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均血压(MBP)、左心室舒张末内压(LVEDP)和左心室内压最大上升或下降速率(±dp/dt)。通过Langendorff离体灌流对心房电传导标测,测定窦性周长(SCL)、房间传导时间(IACT)、房室传导文氏周长(AVWCL)、心房有效不应期(ERP)和房颤诱发,评价心房电重构。病理学通过HE染色测定心肌细胞横截面饥饿,Masson染色测定心肌胶原容积分数。通过ELISA法测定血清胰岛素和超敏C反应蛋白(hs-CRP),黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD),硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA),自动生化仪分析血脂、血肌酐水平。通过透射电镜观察线粒体形态。通过Westernblot测定氧化应激、炎症、纤维化、线粒体生成、线粒体融合和线粒体分裂相关蛋白。结果:(1)过氧化氢组较对照组心房成纤维细胞ROS显著升高,线粒体膜电位下降,线粒体基础呼吸和最大呼吸能力下降,稳心颗粒1g/L组与过氧化氢组相似,稳心颗粒3g/L组上述指标显著改善。(2)糖尿病组大鼠较对照组血糖显著升高、左房直径扩大,而稳心颗粒组与糖尿病组相比无统计学差异。(3)糖尿病组较对照组,心房传导速度减慢,传导异质性增加,房颤诱发率增加,心房胶原容积增加,而稳心颗粒组较糖尿病组上述指标改善。(4)糖尿病组较对照组血清MDA增加,SOD活性下降,稳心颗粒组较糖尿病组改善。糖尿病组和糖尿病 稳心颗粒组较对照组hs-CRP均显著升高。Westernblot结果表明糖尿病组较对照组炎症蛋白NF-κb及促纤维化蛋白TGF-β表达水平增加,而稳心颗粒组对上述蛋白无影响。糖尿病组纤维化蛋白α-SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原升高,稳心颗粒显著减少这些蛋白表达水平。(5)糖尿病组心房线粒体膜电位显著降低,线粒体形态肿胀、空泡化、嵴断裂,肌丝断裂,稳心颗粒组升高膜电位水平,改善线粒体形态,肌丝形态较完整。糖尿病组左心房线粒体生物合成蛋白(TFAM和NRF1)、线粒体融合蛋白(Mfn1和Mfn2)、线粒体分裂蛋白(Drp1)表达降低,稳心颗粒干预后显著增加这些蛋白的表达水平。结论:稳心颗粒可以抑制过氧化氢体外诱导和糖尿病诱导的体内氧化应激并改善线粒体结构及功能,减轻心房重构,降低糖尿病大鼠的房颤发生率。