【摘 要】
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本研究着重于人ES细胞培养体系的改良和建立携带α-地中海贫血遗传疾病基因人ES细胞系，以期构建高效稳定的人ES细胞分离培养技术平台和为α-地中海贫血的体外基因治疗提供生物
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本研究着重于人ES细胞培养体系的改良和建立携带α-地中海贫血遗传疾病基因人ES细胞系，以期构建高效稳定的人ES细胞分离培养技术平台和为α-地中海贫血的体外基因治疗提供生物学材料。
本研究对人ES细胞培养体系进行了改良，包括：囊胚内细胞团(innercellmass，ICM)的有效分离、人ES细胞培养液成分的改良和人ES细胞冷冻保存效率的提高，以建立高效稳定的人ES细胞分离培养技术平台，为将来治疗性克隆的实施奠定坚实基础，应用改良ES细胞培养体系建立三株人ES细胞系。该技术在临床的广泛应用可为出生的试管婴儿储备遗传背景相近的ES细胞，旨在评价机械法分离囊胚ICM的效率，以及比较机械法和免疫外科法分离ICM后人ES细胞原代克隆的形成率；评估采用含血清替代物的培养液与含胎牛血清的培养液对人ES细胞生长速率的影响；探讨玻璃化冷冻法对人ES细胞的冷冻效率；使用常规试管婴儿术中正常受精，不适于移植或冷冻的低质量胚胎建立核型正常、可在体外保持未分化状态并具无限分化潜能的人ES细胞系；使用PGD周期筛选出的携带α-地中海贫血基因胚胎建立携带α-地中海贫血基因、核型正常、可在体外保持未分化状态并具无限分化潜能的人ES细胞系。对所建立的人ES细胞系进行全能性的相关鉴定。
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