D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠T淋巴细胞的改变及其意义

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(1.24±0.21) μmol/L上升至(4.14±0.82) μmol/L(P<0.01)。结论:本实验成功的建立了D-半乳糖亚急性衰老小鼠模型。第二部分D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠胸腺T细胞的改变及其意义目的:探讨D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠胸腺T细胞的改变及其意义。方法:在D-半乳糖亚急性衰老小鼠模型成功建立的基础上,采用免疫荧光标记技术和流式细胞仪检测技术(FCM)对胸腺T细胞重要膜型分子进行检测分析;制作小鼠胸腺组织石蜡切片,免疫组化染色(ICH),观察胸腺细胞Fas分子的表达;H-E染色,观察胸腺组织结构的变化。结果:模型小鼠胸腺细胞CD3分子表达下降(P<0.05),其中初始T细胞相关分子CD45RA表达下降(P<0.05);胸腺T细胞活化相关分子CD28(P<0.05)和CD25(P<0.05)表达下降;小鼠胸腺T细胞活化负性调控分子PD-1表达上升(P<0.01);小鼠胸腺记忆T细胞相关分子CD196表达上升。胸腺组织的免疫组化切片显示胸腺细胞Fas分子表达上升;H-E切片显示模型组小鼠胸腺皮质减少,并和髓质连成一体,皮、髓质界限模糊,胸腺细胞分布稀疏。结论:机体衰老时胸腺中T细胞总量减少,初始和活化T细胞减少,记忆T细胞增多,衰老个体胸腺细胞调亡增加,胸腺萎缩,组织退化,功能降低。第三部分D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠脾脏T细胞的改变及其意义目的:探讨D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠脾脏T细胞的改变及其意义。方法:在D-半乳糖亚急性衰老小鼠模型成功建立的基础上,免疫荧光标记技术和流式细胞仪检测技术(FCM)检测模型小鼠脾脏中初始、活化和调节性T细胞(Tr)亚群的改变;制作小鼠脾脏组织切片,免疫组化染色(ICH),观察脾脏细胞Fas分子的表达;H-E染色,观察脾脏组织结构的变化;酶联免疫吸附技术(ELISA)检测模型小鼠血清中IFN-γ和IL-4含量的变化。结果:模型组小鼠脾脏中初始T细胞相关分子CD45RA表达下降(P<0.01);活化T细胞相关分子CD25表达下降(P<0.05);CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)特征性分子Foxp3表达上升(P<0.05)。脾脏组织的免疫组化切片显示脾脏细胞Fas分子表达上升;H-E切片显示模型组小鼠脾脏白髓区缩小,红髓区扩大,白髓与红髓界限模糊,边缘区不甚明显。模型组小鼠血清中IFN-γ为(82.93±2.74) pg/mL与对照组(125.41±3.16) pg/mL相比,含量降低(P<0.01);IL-4含量为(8.28±2.47) pg/mL与对照组(12.49±3.53) pg/mL相比,含量降低(P<0.01)。结论:机体衰老时脾脏中初始和活化T细胞减少,CD4+CD25+Tr细胞增多,脾脏萎缩、退化,凋亡细胞增多,T细胞活化及免疫调节能力下降。
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