人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)的核壳体蛋白(NC)含有两个高度保守的锌指结构(CCHC型)，而它又在HIV-1生活周期的多个阶段多个步骤中都起到非常关键的作用，因此核壳体蛋白成为近年来抗HIV药物研究的热点之一，但是出于HIV高度的遗传变异性和抗HIV药物的高毒副作用及高昂的价格，HIV口服疫苗在控制HIV感染和艾滋病流行中的重要生物医学干预作用便由此凸显出来。　　 本实验课题是从pNL4-3质粒经PCR得到HIV-1 NC的编码序列，然后克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a(+)相应的酶切位点中，成功构建了重组pET-28a(+)原核表达载体。将此重组质粒转化E.coli BL21(DE3)，经IPTG诱导表达并经Westernblotting鉴定成功表达后，裂解菌体，进行纯化。重组蛋白存在于上清中，首先采用Ni柱亲和层析初步纯化，超滤浓缩后通过凝胶过滤层析进一步纯化，收集并浓缩重组蛋白，免疫新西兰雄兔，自制多克隆抗体并利用抗原亲和层析纯化多克隆抗体。另一方面，首先利用杆状病毒载体pFastBacl作为供体质粒，将HIV-1NC的编码序列转座到Bacmid上，构建重组Bacmid-nc。脂质体转染家蚕BmN细胞得到重组病毒后，通过荧光定量PCR测定了重组病毒的滴度，用扩增后的重组病毒感染家蚕细胞，以自制并纯化的多克隆抗体为一抗，Western blotting鉴定目的蛋白NC在家蚕细胞中已成功表达，并自制抗体亲和纯化柱从细胞中进行了目的蛋白的纯化。最后，用重组病毒分别大量接种家蚕五龄幼虫和蛹，Westernblotting鉴定NC在家蚕幼虫及蛹中也得到成功的表达。　　 发病蚕蛹和正常蚕蛹分别经匀浆、过滤、离心、超滤、冻干后，研究小鼠口服免疫效果。实验组包括原核免疫组(原核表达的重组蛋白+正常蚕蛹粉)和真核免疫组(表达NC的发病蚕蛹粉)，对照组包括0.9％生理盐水组和正常蚕蛹粉组。最终用间接ELISA检测小鼠血清抗NC特异性抗体的反应情况。　　 本研究在利用家蚕杆状病毒表达系统成功表达HIV-1 NC抗原蛋白的基础上，初步探讨了蚕蛹中表达的HIV-1 NC及其原核表达的重组蛋白对小鼠的口服免疫原性，为利用家蚕杆状病毒表达系统低成本研发以HIV-1 NC为免疫原的HIV口服疫苗提供了依据。