丙型肝炎病毒(HCV)NS3区基因的克隆、表达及产物的纯化和抗原性分析

来源 :中国药品生物制品检定所 中国食品药品检定研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cecil666666
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为分析和比较丙型肝炎病毒(HCV)NS3基因不同表达产物的抗原活性,我们克隆了HCV 1b型全长的NS3基因及部分NS3基因,又克隆了HCV 1a型部分NS3基因,构建了5个表达质粒.对表达产物进行了纯化,并作为抗原,检测抗HCV国家参考品血清及部分临床样本,比较了它们的抗原性.为进一步验证pET/80/1b的抗原性,用pET/80/lb组装的单片段试剂和目前国际主流的第三代抗HCV EIA试剂ORTHO HCV ELISA 3.0试剂对92份临床样本血清同时进行检测,两种试剂共同阳性的标本43份,共同阴性的标本40份,有9份样本结果不一致.由于Ortho试剂中除了含NS3抗原外,还有HCV C,NS4和NS5抗原,而该实验所用的只有NS3抗原,所以对结果不一致的样本用分片段试剂进行了抗体谱分析,发现Ortho试剂漏检1份,pET/80/1b试剂漏检1份,并出现了两份非特异阳性反应,此4份样本都有待于进一步的实验验证.
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