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目的：将SP1 Decoy ODN与SMAD3/STAT3/Elk1 Decoy ODNs联合作用于活化的肝星状细胞（HSC），筛选并确认能有效抑制HSC活化，下调Ι型胶原蛋白（COLΙ）表达的Decoy ODNs组合；将SP1/UTE1 Decoy ODNs联合作用于活化的HSC后，确认其能否有效的靶向下调 TIMP1的表达，进而是否能抑制 HSC活化和增殖，增加COLΙ的降解。 方法：(1)通过分子克隆构建TIMP1启动子驱动的荧光素酶报告质粒；(2)针对本课题组前期筛选的6个有效的Decoy ODNs，将其中的SP1 Decoy ODN分别联合SMAD3/STAT3/Snail/Elk1/UTE1 Decoy ODNs，作用于HSC-T6后，通过荧光素酶报告基因分析法进行筛选，Western blot检测胶原蛋白、TGF-β、α-SMA和TIMP1等肝纤维化相关蛋白的表达；(3) SP1 Decoy ODN和UTE1 Decoy ODN联合作用于HSC-T6后，MTT法检测其对细胞增殖的影响。 结果：(1)成功构建了TIMP1启动子驱动的荧光素酶报告质粒pGLuc-P-TIMP1，与前期成功构建的3个荧光素酶报告质粒(pGLuc-TRE-MiniTK、pGLuc-PSMA和pGLuc-P-COLΙα2)一起形成了较为完善的抗肝纤维化荧光素酶报告基因筛选平台。(2)通过荧光素酶报告基因筛选平台初步确认，较单一因素作用，SP1 Decoy ODN联合SMAD3/STAT3/Elk1 Decoy ODNs，能进一步下调TRE增强子驱动的GLuc表达，SP1 Decoy ODN联合STAT3/Elk1 Decoy ODNs，能下调TIMP1启动子驱动的GLuc表达， SP1 Decoy ODN联合Snail/Elk1 Decoy ODNs，能下调COLΙα2启动子驱动的GLuc表达， SP1 Decoy ODN联合STAT3 Decoy ODN，能进一步下调α-SMA启动子驱动的GLuc表达。Western blot确认，较单一因素作用，SP1 Decoy ODN联合Elk1 Decoy ODN，能进一步下调HSC-T6中COLΙα2的表达；SP1 Decoy ODN联合Elk1 Decoy ODN比单一的SP1 Decoy ODN作用，更能下调HSC-T6中α-SMA的表达。(3)通过荧光素酶报告基因筛选平台初步确认，较单一因素作用，SP1 Decoy ODN联合UTE1 Decoy ODN，均能进一步下调TIMP1、COLΙα2和α-SMA启动子驱动及TRE增强子驱动的GLuc表达；Western blot确认，联合作用较单一因素作用，能进一步下调HSC-T6中TIMP1、COLΙα2和α-SMA的表达；MTT法显示，联合作用72小时后，较单一因素更能抑制HSC-T6的增殖。 结论：SP1 Decoy ODN联合Elk1 Decoy ODN通过抑制α-SMA和COLΙα2启动子活性，进而抑制HSC-T6的活化，下调COLΙα2的表达；SP1 Decoy ODN联合UTE1 Decoy ODN通过负调控TIMP1启动子的活性，进而抑制HSC-T6的活化和增殖，下调COLΙα2的表达。