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本研究分为二部分:
第一部分:水通道蛋白1在宫颈病变中的表达及意义
目的:水通道蛋白1是水通道蛋白家族成员,它在肿瘤血管内皮细胞的增殖,肿瘤细胞的生长、运动迁徙能力的增强中起到一定的作用。本研究检测子宫颈病变组织中水通道蛋白1的表达,探讨该蛋白在宫颈癌形成和演进进程中的意义。
方法:采用免疫组织化学SP法检测83例石蜡包埋的子宫颈组织中水通道蛋白1的表达情况,并结合临床病理分型分析其表达的意义。
结果:水通道蛋白1在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈癌组织中的阳性率分别为4.0[%],33.3[%]和74.2[%],三组样本中水通道蛋白1的阳性率相互之间差异有显著意义(P<0.05),宫颈癌病理学分级Ⅰ+Ⅱ和Ⅲ相比,差异有显著意义(P<0.01)。水通道蛋白1表达阳性率与CIN的分级,与宫颈癌临床分期、组织学分型和淋巴结转移无关(P>0.05)。
结论:水通道蛋白1在宫颈癌前病变和宫颈癌组织中表达升高,可能在宫颈癌的发生发展过程中起重要作用。
第二部分:上调水通道蛋白1的表达逆转卵巢癌细胞株
目的:研究水通道蛋白1在卵巢癌耐药细胞株C13K化疗耐药中作用。
方法:构建水通道蛋白1正义真核表达载体,稳定转染卵巢癌耐药细胞株C13K,RT-PCR及western blot分析AQP1的表达;CCK-8细胞毒性试验和流式细胞仪检测细胞凋亡率。
结果:(1) FACS检测转染水通道蛋白1真核表达载体的细胞经顺铂作用后细胞凋亡率高于转染空载体和未转染的细胞;(2)CCK-8细胞毒性试验示转染水通道蛋白1真核表达载体细胞相对于转染空载体和未转染的细胞对顺铂敏感性更高。
结论:上调水通道蛋白1表达,可一定程度逆转卵巢癌耐药细胞株C13K对顺铂的耐药。