白藜芦醇对前列腺癌PC-3细胞自噬影响的实验研究

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目的通过实验观察白藜芦醇对前列腺癌PC-3细胞自噬的影响,探讨白藜芦醇抗前列腺癌的可能机制。方法l、选用前列腺癌PC-3细胞进行培养,采用cck-8法检测白藜芦醇不同浓度组(0、20、40、80、160μmol/L)、不同时间(24、48、72h)对PC-3细胞增殖的影响。2、设置对照组和实验组,提取各组细胞的总RNA,鉴定其完整性及含量,通过RT-PCR法检测白藜芦醇处理前后各组PC-3细胞中LC-3和Beclin1mRNA的表达量。3、免疫印记法(Western blot)检测白藜芦醇作用24h后LC3-Ⅱ蛋白的表达量。结果1、CCK-8的结果显示:白藜芦醇在(20~160) μmol/L浓度范围内能够有效地抑制PC-3细胞的增殖,并随着时间和浓度的增加,其抑制率也相应地提高,以160μmol/L组作用72h抑制率最显著。不同药物浓度组、不同作用时间对前列腺癌PC-3细胞增殖抑制率差异均具有统计学意义(P<0.05)。2、RT-PCR检测结果显示:白藜芦醇不同浓度组处理PC-3细胞24h后,LC3和Beclin1mRNA的表达量都有不同程度的上升。160μmol/L白藜芦醇浓度组对PC-3细胞LC3和Beclin1mRNA表达提升最显著,不同浓度组间LC3和Beclin1mRNA表达水平差异具有统计学意义(P<0.05);3、Western blot结果显示:白藜芦醇不同浓度组干预PC-3细胞24h后,随着药物浓度的增大,LC3-Ⅱ蛋白表达也逐渐上升。且不同浓度组间LC-Ⅱ蛋白表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。结论l、在一定浓度范围内,白藜芦醇能够抑制PC-3细胞增殖,并呈浓度-时间效应。2、白藜芦醇能够在mRNA和蛋白质水平增强PC-3细胞中LC3和Beclin1的表达。3、白藜芦醇可能是通过诱导细胞自噬性死亡来抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖。
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