单核/巨噬细胞系统及淋巴细胞在面神经再生中的作用研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mzhou2009
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我们通过分离培养外周血中的单核/巨噬细胞及淋巴细胞,直接回输于面神经损伤局部,观察这两种细胞的"过继治疗"对神经损伤后神经再生修复的影响,试图找出面神经损伤后可行的再生修复的方法.方法:将30只年龄约8w的Wistar雄性大鼠随机分成三组,分别为:单核/巨噬细胞局部回输组;淋巴细胞局部回输组;对照组.抽取大鼠尾静脉血1.5ml等倍稀释后,通过密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞,单个核细胞悬液经贴壁后,分离出单核细胞和淋巴细胞,分别加入适量GM-CSF.培养36h后收集总数至少为1×10<5>单核/巨噬细胞和淋巴细胞,分别悬于20ul RPMI 1640中.同时分离大鼠两侧的面神经颊支,用BL-420E生物信号采集系统记录神经肌肉复合动作电位传导速度.随后在神经出腮腺后1.5cm~2cm处剪断颊支,立即缝合.并在损伤周围将筋膜游离造成一潜在腔隙,将20 u1两种细胞悬液分别回输至两侧(5×10<4>/侧)损伤处的筋膜下(损伤神经周围),缝合筋膜和皮肤,待完全清醒后回笼饲养.分别于2w和8w通过测定面神经颊支—触须肌复合动作电位传导速度、触须与身体长轴的夹角及辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)神经逆行示踪显示脑干内面神经核团的神经元阳性数目来观察面神经轴突再通的程度.每组采用5只大鼠,双侧均行面神经颊支离断,在显微镜下用11/0无损伤缝合线立即缝合,测量双侧面神经颊支—触须肌复合肌肉动作电位的传导速度和双侧触须与身体长轴的夹角,采用术后与术前的比值进行数据处理,并计算HRP神经逆行示踪的阳性神经元数目,统计方法为t检验.结论:神经系统与免疫系统有一定的相互作用,其中单核/巨噬细胞系统及淋巴细胞不仅是免疫系统重要细胞成分,而且在外周神经损伤时,单核/巨噬细胞系统的存在及侵入神经外膜内是神经损伤后神经再生修复的前提.已有的研究资料表明,体内的单核/巨噬细胞在神经损伤后随血液到达神经损伤局部,对神经再生修复起促进作用,而我们的实验则发现,体外培养的的单核/巨噬细胞系统及淋巴细胞自体回输后,通过"过继治疗"对面神经损伤神经再生有一定的促进作用.
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