黄鳝抗苗勒氏管激素(AMH)cDNA克隆及其表达分析

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抗苗勒氏管激素(anti-mullerian hormone,AMH),也称为苗勒氏管抑制物质(Mullerian inhibiting substance,MIS),是β-转化生长因子(TGF—β)超家族成员之一,具有调节生殖细胞发育及分化的作用。在哺乳动物中,AMH由胚胎精巢的支持细胞产生,并引起苗勒氏管(在雌性中将分化成输卵管、子宫等)的退化。AMH不仅在哺乳类性腺发育早期中发挥作用,而且在后期两性的性腺发育也都起着调控作用。 本文采用.RT-PCR和RACE法,成功地从黄鳝问性时期的性腺中克隆得到AMH cDNA的全长。该cDNA序列含有一个1644bp的开放读码框(Open readingframe,ORF),编码了一含548个氨基酸的蛋白。氨基酸序列分析表明它的C端(羧基端)的保守区域有7个半胱氨酸残基,这是TGF-β超家族特征之一。进化树分析完表明,黄鳝AMH蛋白与其他鱼类AMH蛋白处于同一簇,与舌齿鲈和比目鱼AMH同源性最高,分别达63.8﹪和63.5﹪。 采用RNA反义探针原位杂交技术,对AMH基因在黄鳝性腺中的表达情况进行了分析。结果表明:在雌性性腺中,AMH mRNA在滤泡细胞的颗粒细胞中表达;在间性性腺中,不仅在早期精巢的未分化的支持细胞中检测到AMH表达,同时在败育的卵母细胞颗粒细胞中也检测到其表达;在雄性性腺中,AMH mRNA在成熟精巢的支持细胞中表达。这种细胞表达模式以及在黄鳝性逆转过程表达表明:AMH在黄鳝性腺发育和性逆转过程中都起到一定的作用。
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