目的:研究三磷酸鸟苷环化水解酶1(Guanosine triposphate cyclohydrolase 1,GCH1)能否参与小胶质细胞活化以及观察GCH1基因表达对BV2小胶质细胞中ERK信号转导通路和下游炎症因子的影响,从而进一步探讨GCH1在神经病理性疼痛中的作用机制,为其靶向治疗提供新思路。方法:1.选取生长状态良好的BV2系小胶质细胞,分别通过质粒转染和病毒干扰的方式上调和下调小胶质细胞GCH1基因的表达。将不同干预条件的小胶质细胞分为以下五组:正常对照组(BLANK组),空载质粒组(NC组),GCH1高表达组(GCH1过表达组),空载病毒组(NC siRNA组),GCH1低表达组(siRNA GCH1组)。2.运用荧光电镜观察GCH1表达状态以及对小胶质细胞的活化程度的影响,并通过Western Blot及RT-PCR法检测小胶质细胞活化标记物CD11b在不同分组中的表达差异。通过Western Blot检测BV2小胶质细胞中GCH1、ERK、p-ERK在蛋白水平上的表达;采用RT-PCR技术检测GCH1、ERK、p-ERK在mRNA水平的表达;采用RT-PCR、ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-6的表达水平。结果:1.应用质粒转染和病毒干扰可建立BV2小胶质细胞的GCH1高表达和低表达模型。2.GCH1高表达可上调小胶质细胞的ERK磷酸化水平并活化小胶质细胞,增加促炎因子(TNF-α、IL-6)的表达水平;相反,GCH1低表达可下调小胶质细胞的ERK磷酸化水平,活化小胶质细胞受到抑制,促炎因子(TNF-α、IL-6)的表达水平下降。结论:细胞转染可上调或下调BV2小胶质细胞中GCH1基因的表达。小胶质细胞的活化与GCH1基因表达量呈正相关,GCH1可通过调节ERK通路介导小胶质细胞的活化。在GCH1转染介导的小胶质细胞活化模型中炎症因子IL-6、TNF-α释放增多。