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目的1、将低分化人胃癌细胞BGC-823移植于裸鼠体内,构建胃癌裸鼠移植瘤模型。2、探讨重组真核表达质粒pGenesil-MMP-9对人低分化胃癌细胞BGC-823裸鼠移植瘤在裸鼠体内生长、体积、重量和MMP-9蛋白表达产生的影响。方法将45只裸鼠随机分成5组,每组9只。将人低分化胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠右侧肩胛区,待成瘤后对瘤体进行隔日、多位点直接注射治疗。第一组注射非特异性shRNA编码序列的通用阴性对照质粒pGenesil-HK,简称pGenesil-HK组;第二组注射opti-MEM培养基,简称opti-MEM组;第三组注射pGenesil空载体,简称pGenesil空载组;第四组注射SofastTM脂质体,简称Sofast组;第五组注射重组真核表达质粒pGenesil-MMP-9,简称pGenesil-MMP-9组。第一至四组为对照组,第五组实验组。各组裸鼠在SPF条件下的动物实验室饲养,观察肿瘤的生长情况,于最后一次治疗后第2天将所有裸鼠处死,通过病理切片HE和免疫组织化学染色对肿瘤标本进行分析。取少量新鲜瘤体标本速冻后再存储于-80℃,用于实时荧光定量PCR检测MMP-9的mRNA表达水平。结果1、各组裸鼠在接种人低分化胃癌BGC-823细胞1周后形成肿瘤;实验组经注射pGenesil-MMP-9质粒后,肿瘤体积和重量明显小于4个对照组,差别均有统计学意义(P<0.05)。2、免疫组织化学检测结果显示,pGenesil-MMP-9组的MMP-9蛋白表达呈弱阳性;pGenesil-HK、pGenesil空载、Sofast和opti-MEM对照组中MMP-9表达呈强阳性,差别均有统计学意义(P<0.05)。3、各组间肿瘤标本MMP-9的mRNA含量不同,pGenesil-MMP-9组的mRNA含量低于对照组,差别均有统计学意义(P <0.05)。结论1、经RT-qPCR和MMP-9免疫组织化学检测发现,人低分化胃癌细胞BGC-823表达MMP-9蛋白。2、在体内,重组真核表达质粒pGenesil-MMP-9能显著降低胃癌裸鼠移植瘤瘤体MMP-9的mRNA转录和蛋白表达水平。3、载体介导的MMP-9基因沉默可显著降低胃癌裸鼠移植瘤瘤体的体积和重量。4、RNAi作为一种肿瘤的基因治疗手段,具有良好的应用前景,MMP-9有望成为治疗胃癌的新靶点。