【摘 要】
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使用葡萄糖酵母膏培养基,摇床培养黄曲霉A.3.4408、杂色曲霉A.3.4413,获得培养过滤液,经旋转蒸发浓缩、透析,再经PEG吸水浓缩后,用作免疫抗原.卡介苗刺激兔的免疫系统,通过多
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使用葡萄糖酵母膏培养基,摇床培养黄曲霉A.3.4408、杂色曲霉A.3.4413,获得培养过滤液,经旋转蒸发浓缩、透析,再经PEG吸水浓缩后,用作免疫抗原.卡介苗刺激兔的免疫系统,通过多点、多途径以及长时间注射,分别获得这两株产毒真菌离体抗原的抗血清1°和3°.经琼指双扩测定效价为1:16与1:32,酶联免疫吸附测定(ELISA)效价为1:25600、1:12800.两种抗血清随后用来测试专一(特异)性.通过与八株曲霉属、四株青霉属、三株木霉属菌株及根霉属、毛霉属各二株进行琼脂双扩测定,发现所获多克隆抗血清1°与各菌株都有强弱不等的沉淀交叉反应,3°与各菌株离体抗原的琼扩交叉反应则表现为弱或无.通过对特征免疫沉淀线的识别,能够分别鉴别出黄曲霉A.3.4408、杂色曲霉A.3.4413.指出抗血清1°有一特异抗体成分,预示着黄曲霉A.3.4408离体抗原中有一特定的离体抗原(Agaf2).抗血清3°则有多个特异抗体成分,预示杂色曲霉A.3.4413也产生或携带着特定的抗原.通过竞争ELISA反应,各菌株离体抗原与抗血清1°、3°的交叉反应都不强,这为应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术进行快速、灵敏、简便、专一的产毒真菌的检测打下基础.该文对研究结果进行了讨论,并提出运用离体抗原制备技术,获得特异性抗血清,再结合血清学技术如ELIDA等,开展对名种产毒真菌的免疫诊断工作是可行的.
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