亚硒酸钠对氯化镉致猪肺泡巨噬细胞损伤的拮抗作用研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ccsrg
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
镉具有广泛的毒性损伤作用,对机体多处器官、系统具有毒性损伤。镉的损伤机制在细胞层面会导致脂质过氧化,线粒体、DNA损伤以及细胞因子的分泌紊乱从而导致机体氧化应激,细胞死亡以及炎性损伤。镉属于重金属,具有富集性,很难被降解,能随食物链进入人体,进而危害人体健康。硒抗氧化、抗炎、增强免疫机能、解除重金属毒害等生物学功能。本研究通过体外培养传代细胞猪肺泡巨噬细胞,单独或联合添加氯化镉(CdCl2)和亚硒酸钠(Na2SeO3),探讨Na2SeO3对CdCl2毒性损伤的拮抗作用,主要从CdCl2对猪肺泡巨噬细胞的损伤作用,以及Na2SeO3对CdCl2致肺泡巨噬细胞损伤的保护作用研究两方面出发。以期为未来重金属损伤作用的研究及治疗药物的研发提供新的方法和思路,为硒拮抗重金属的生物学功能提供理论依据,为该领域的研究提供一种新思路;同时本研究也有助于促进畜牧业的健康发展和人类公共卫生的安全。试验方法:(1)本试验采用CCK-8方法检测不同浓度的CdCl2(CdCl2在培养液中的初始浓度为:0、40、80、100、120、140、160、200、240μmol/L)和不同浓度的Na2SeO3(Na2SeO3在培养液中的初始浓度为:64、32、16、8、4、2、1、0.5μmol/L)作用24h对猪肺泡巨噬细胞活力的影响,并计算出24h时CdCl2致猪肺泡巨噬细胞的半数抑制浓度(IC50)和Na2SeO3作用于细胞的最适作用浓度;(2)根据CdCl2的IC50和Na2SeO3的最适作用浓度,将试验分为G1组(IC50)、G2组(1/2 IC50)、G3(1/4 IC50)、X组(8μmol/L Na2SeO3)、GX1组、GX2组、GX3组。通过CCK-8法检测CdCl2和Na2SeO3单独或联合作用下对猪肺泡巨噬细胞活力的影响;(3)通过单独或联合添加CdCl2和Na2SeO3,体外培养24h,收集细胞上清液,试剂盒检测上清液中LDH的活性,以及ELISA法检测IL-1α、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α的含量;(4)通过单独或联合添加CdCl2和Na2SeO3,体外培养24h后,收集细胞及上清液,试剂盒检测细胞中LDH、SOD、CAT、GSH-PX的活性以及MDA、GSH的含量。试验结果:(1)CdCl2和Na2SeO3分别单独作用猪肺泡巨噬细胞24h,通过CCK-8法检测得出两者对细胞活力的影响,得出CdCl2和Na2SeO3对细胞的作用均表现为“双重性”,细胞处于高浓度镉(>80μmol/L)环境中时,CdCl2对细胞活力显著抑制(P<0.01),而处于低浓度镉(<40μmol/L)环境中时,CdCl2能促进细胞活力;细胞处于低浓度硒(<16μmol/L)环境时,对细胞活力具有促进作用,而高浓度(>32μmol/L)时则表现出一定的毒性作用。CdCl2致体外培养的猪肺泡巨噬细胞的IC50为106±0.02μmol/L;Na2SeO3作用于体外培养猪肺泡巨噬细胞的最适浓度为8μmol/L,此时细胞存活率1.2197±0.1523%。(2)CdCl2单独作用猪肺泡巨噬细胞24h时,细胞存活率随着CdCl2浓度的上升而下降;与对照组相比,G1组(106μmol/L)明显抑制细胞活性(P<0.01),G2组(53μmol/L)抑制细胞活性但不明显(P>0.05),G3组(26.5μmol/L)促进细胞活性。Na2SeO3(8μmol/L)单独作用猪肺泡巨噬细胞24h,同B组相比,Na2SeO3显著提高细胞的活性(P<0.01)。联合添加CdCl2和Na2SeO3培养24h,同单独添加CdCl2相比,细胞活力均有所提高。(3)CdCl2单独作用猪肺泡巨噬细胞24h,与对照组相比,细胞培养上清中LDH活性升高,IL-10含量、IL-4含量升高,IL-1α含量、IL-6含量降低,TNF-α在高浓度镉环境中含量上升,低浓度镉环境中含量下降;Na2SeO3单独作用猪肺泡巨噬细胞24h,与对照组相比,上清液中IL-10、IL-4、IL-6、TNF-α的含量显著提升(P<0.05),IL-1α的含量上升但不显著(P>0.05);同时,上清液中IL-1α含量显著降低(P<0.05),LDH活性有所降低(P>0.05)。联合添加亚硒酸钠后,细胞培养上清中IL-10含量、IL-4含量均降低,IL-1α和IL-6的含量上升,对高浓度Cd导致的猪肺泡巨噬细胞TNF-α含量上升有一定的拮抗作用;也能对低浓度Cd导致的猪肺泡巨噬细胞TNF-α含量下降有拮抗作用。(4)CdCl2单独作用猪肺泡巨噬细胞24h,导致细胞中SOD、CAT、GSH-PX的活性降低,且均随浓度的升高而降低;细胞中MDA和GSH的含量升高。Na2SeO3单独作用猪肺泡巨噬细胞时,提高细胞内SOD、CAT、GSH-PX的活性和GSH含量;降低了细胞中MDA的含量。联合添加亚硒酸钠后,细胞中SOD、CAT、GSH-PX的活性升高,MDA含量降低,GSH含量降低。结论:CdCl2能造成猪肺泡巨噬细胞的损伤,导致细胞活力的下降。CdCl2和Na2SeO3对猪肺泡巨噬细胞的作用均表现为“双重性”,CdCl2致体外培养的猪肺泡巨噬细胞的IC50为106±0.02μmol/L;Na2SeO3作用于体外培养的猪肺泡巨噬细胞的最适浓度为8μmol/L;8μmol/L的Na2SeO3对CdCl2(106μmol/L、53μmol/L、26.5μmol/L)诱导的猪肺泡巨噬细胞的损伤具有保护作用。总的来说,硒就有抗炎、抗氧化的作用,对CdCl2致猪肺泡巨噬细胞损伤具有拮抗作用。
其他文献
本试验以多花黑麦草(Lolium multiflorum Lam.)和玉米秸秆为试验材料,探究多花黑麦草与玉米秸秆混贮比例分别为10:0(S0)和7:3(S1)添加植物乳杆菌(Lactobacillus plantment)、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)以及纤维素酶对青贮饲料的发酵过程的动态影响。添加剂设6个处理,分别为:对照、B(布氏乳杆菌)、BC(布氏乳杆菌+纤维
我国社会主义市场经济的发展日新月异,地铁民警面对着更大的压力和挑战。“天下安危,公安系于一半”,地铁民警维护着城市主要出行交通工具的平安运行,地铁民警的工作艰苦又危险,伴随着地铁作为大型城市主要交通工具的飞速发展,我国地铁民警比普通群体更多的承受着来自工作、管理、社会、个人和特有方面的压力,这严重影响了地铁民警的身心健康。为了更好保护其身心健康,确保地铁民警工作的顺利开展,越来越多的专家学者开始研
随着城市商业银行发展的速度越来越快,城市商业银行在国内金融体系里所能发挥的作用也变得越来越大。当前我国持续扩张的城市商业银行开始面临更大的市场压力,即国有银行在银行市场中居于垄断地位;部分城市商业银行和股份制银行为了抢占优势市场和客户资源,开始进入营业网点增设阶段;出现了诸如村镇银行、小额贷款公司等在内的新型金融机构,导致银行竞争对手数量增多;持续进入的外资银行给现有银行带来了挑战。以金融行业自由
贫困作为一个世界性难题,曾经长期困扰着中国,中国一直在努力减少和消灭贫困问题。在新时期,习近平主席十分关注扶贫问题,多次对金融扶贫工作提出明确的要求,并研究出了精准扶贫理论及金融扶贫等创新理论,为我国扶贫工作提供了新思路,在扶贫与减贫事业上取得诸多令人敬佩的成绩。普惠金融旨在为更广大的群体提供便捷的金融产品和服务,将低收入群体纳入其服务范围,弥补了银行对低收入群体忽视的短板,为金融扶贫工作提供了新
近年来,随着我国经济的不断发展,中等职业教育为社会的发展提供大量技术型人才,为调整人才供需结构、减少贫富差距、维护社会稳定起着积极的作用。为加快中等职业教育发展的步伐,政府陆续出台相关法律法规,其中最具代表性的是中等职业教育国家助学金政策。中等职业教育国家助学金政策的目的是帮助中等职业贫困生完成学业、缓解在校的经济压力,促进教育的公平公正,提升职业教育在整个教育体系中的竞争力。该政策在积极促进中等
海藻糖的合成由海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)和海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(TPP)共同催化完成,海藻糖-6-磷酸合成酶是该反应的限速酶。将大肠杆菌和酵母菌海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)与海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(TPP)的融合基因,导入烟草、马铃薯、水稻和拟兰芥中获得的转基因植株,耐旱等非生物逆境抗性提高。但是,过量表达大肠杆菌和酵母菌TPS基因的转基因植株生长出现畸形等表型,而过量表达植物内源
目前教育改革蓬勃发展,各个学科都在积极探索良好的方法以提升课堂效率和质量。在初中地理教学中,运用体验式学习模式,带给学生们身临其境的感觉,让他们能够对地理这门学科产生浓厚的兴趣,在今后的学习中以更高的积极性投入到学习中来。但是目前体验式学习模式在初中地理教学中还得不到广泛有效的应用,这就需要教师不断摸索实施策略,将体验式学习模式的有效性发挥出来。基于此本文首先简要分析了初中地理教学中开展体验式学习
改革开放四十年来,我国经济发展不断提高,农村金融成为了解决我国城乡发展不平衡、缩小人口贫富差距的重要手段,其中农村小额信贷是农村金融体系中的重要组成部分。本文基于农村小额信贷的准公共产品视角,探讨了农村小额信贷的发展和政策研究问题。通过对农村小额信贷的的发展和政策支持的相关分析,认为农村小额信贷的发展应充分认识其准公共产品的属性,并结合政府政策和市场,综合的提出政策研究的相关意见。论文首先对国内外
农产品公共交易平台是以现代信息技术对传统农业交易方式的一种升级,是现代农产品交易市场高度发展的必然产物。加强农产品公共交易平台的建设,是推动地方农业产业化发展,促进产业结构调整的有效途径。近几年,中央先后出台多项推动农业产业化发展的政策。在政府引导下,各茶叶原产地相继建立起地方的茶叶公共交易平台,有效推动了地方茶产业转型和升级。作为四川主要茶叶产地的雅安市申请并成立了全国唯一一家由国家部级联合委员
近年来,重庆市、眉山市、成都市等地鹌鹑养殖产业不断发展,养殖方式逐渐向规模化集约化转变的过程中,鹌鹑感染大肠杆菌导致死亡的现象依然时常出现。大肠杆菌作为一种条件性致病菌,是养禽业中引起家禽致病的主要病原菌之一,主要用抗菌药物进行防治。由于在养殖业中抗菌药物长期被过量或违规使用,导致了大量大肠杆菌耐药株的产生,给此种疾病的防治带来一定程度上的困难,所以对鹌鹑源大肠杆菌的耐药性和致病性的监测分析尤为重