结构光照明超分辨微分干涉相衬显微成像技术

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:koala_zz
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
微分干涉相衬(Differential interference contrast, DIC)显微镜,是60年前发展起来的用于观察未染色透明的生物样品(相位样品)。目前,其已经成为使用最广泛的显微成像技术中的一种技术,且在生物医学研究领域具有广泛的应用。DIC成像技术是将样品中相位梯度的变化转化为强度变化,并且由两束横向上有略微距离(几百纳米)的光干涉产生相位的一阶导数信息。对比于荧光显微成像技术,DIC显微镜具有非侵入性和无需样品标记或染色的优点,可以允许人们观察没有处理过的天然的样品,在实际应用中很有意义。而对比于相衬显微镜,DIC显微镜具有以下优点:高空间分辨率;无光晕伪像;光学层析能力。然而,作为一种远场光学显微镜,DIC显微镜的空间分辨率受到了光学成像中衍射法则的限制,这使得许多小于衍射极限的生物结构在DIC成像中不可分辨。因此,为了观察更加精细的结构并且理解它们的功能,提高DIC成像的空间分辨率(打破分辨率衍射极限)显得极为重要。我们提出了一种打破分辨率衍射极限的DIC成像技术,称之为结构光照明DIC(structured illumination DIC, SI-DIC)显微镜。此技术的物理思想是将结构光照明的观念应用于传统的DIC显微镜来扩宽DIC成像系统的相干传递函数(coherent transferfunction, CTF)的带宽,从而使重构得到的DIC图像的分辨率明显优于传统DIC显微镜的成像分辨率。接着,我们进一步发展了结构光照明超分辨DIC成像技术,提出了基于空间光调制器DIC的结构光照明成像技术。此技术在实现超分辨DIC成像的同时,具有结构相对简单且DIC的重要参数(剪切方向、大小及基延迟)很容易变换的优点。本文取得的主要创新研究结果如下:(1)提出了结构光照明DIC超分辨显微成像技术。发展了结构光照明DIC成像理论,并通过计算机仿真的方法,验证了提出的结构光照明DIC成像理论。设计并建立了结构光照明DIC超分辨显微成像系统。使用数值孔径为0.8的聚光镜与物镜,以53nm聚苯乙烯小球样品,测量系统成像分辨率,获得了190nm的成像分辨率,打破了传统DIC成像分辨率衍射极限(380nm)。较传统DIC成像,结构光照明DIC成像的分辨率提高了两倍。并使用结构光照明DIC成像系统观察了生物样品(人脐静脉内皮细胞),同样获得了超分辨的实验结果,展示了此技术在生物学方面的应用。(2)提出了基于空间光调制器DIC的结构光照明成像技术。研究了基于空间光调制器的DIC成像原理,建立了基于空间光调制器DIC的结构光照明成像系统。由于空间光调制器的灵活性,应用此成像系统可以方便地获得各种DIC重要参数(剪切方向、大小及基延迟)的DIC成像结果。使用数值孔径为0.8的聚光镜与物镜,以53nm聚苯乙烯小球样品,测量基于空间光调制器DIC的结构光照明成像系统分辨率,获得了211nm的成像分辨率,同样打破了DIC成像分辨率极限。较基于空间光调制器的DIC成像(435nm),基于空间光调制器的DIC结构光照明成像的分辨率提高了两倍。
其他文献
在全球经济形势低迷的情形下,各国通过寻求科技创新的重大突破抢战新一轮经济发展的先机。继承计划经济时间“举国体制”的传统经验,探索新型科技“举国体制”是我国实现重点领
以皖江城市带九市一县一区与珠江三角洲九市作为研究对象,利用内生经济增长函数模型对两地区的科技投入与经济产出进行实证分析,研究结果显示:皖江城市带地区应该强化企业科技研
本文从儿童科学教育的独特目标谈起,论述科学教育中教师的教育素养与实践能力。从教师的个性特点、教育机智、实践能力三方面论述对幼儿科学教育产生的影响。谈到了教师与幼
目的(1)应用描述流行病学方法分析内蒙古自治区布病发病的流行趋势及等级分布特征;(2)应用GIS软件和R软件技术揭示内蒙古自治区2006-2010年布病的空间分布特征及空间聚集性情况;(3
公共政策目标体现的是整个公共行为的根本价值,是决定政策效果的根本所在。政策目标的确定主要取决于决策者在规划政策时对事实前提和价值前提,即事与愿的关系的拿捏。文章以19
<正>介绍了在高新技术条件下,美国空军在计量保障体系建设方面的做法。结合我国的实际情况,对我国空军计量保障体系建设提出了建议和设想。随着现代科学技术的飞速发展和大量
科技报告作为国家重要的战略信息资源,其制度体系建设对政府财政投入形成的科学技术资产进行有效管理,并使之成为国家科技创新体系的基础保障条件具有重要意义。文章分析建立科
本文通过刘师培对焦循学术的援引、总结、分析和宣传,从一个侧面揭示了刘师培与扬州学派之间的关联.
以大型液体火箭发动机故障诊断系统框架为基础,按照发动机没工作阶段的特点建立了相应的故障检测与诊断算法。利用发动机的高阶数学模型,对基于推广的卡尔曼滤器技术的新息检测
市场精神结构是分析市场精神在不同时期的内容及其表现形式的逻辑起点,而市场精神结构的分析需要摒弃任何简单的表面建构,必须紧紧围绕市场精神的本质及其生成路径从哲学维度