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目的:本研究采用单纯长程20周高脂肪饲料喂养正常SD雄性大鼠,模拟接近人类IGT的发病过程,建立单纯饮食诱导型的IGT动物模型,从胰岛素受体后信号通路探讨IGT发病的机制,进一步探讨温胆汤、加味温胆汤对IGT大鼠作用机制及其作用靶点,为临床合理治疗IGT提供实验依据,并为大鼠IGT模型复制的研究,提供技术平台。方法:将符合IGT模型标准的大鼠随机分为温胆汤组、加味温胆汤组以及IGT模型对照组三组,另设普通饲料喂养的空白对照组。空白对照组、IGT模型对照组每天按固定时间以1 Oml/kg体积灌胃给予蒸馏水,温胆汤组(6.1 8g/kg)、加味温胆汤组(11.25g/kg)灌胃给予同体积的相应复方水煎剂。HE染色法观察肝脏、骨骼肌、脂肪组织形态变化,免疫组化法测定大鼠肝脏、骨骼肌、脂肪组织中的PI3K、PKB、GSK-3β、GLUT-4蛋白的表达,Western Blot法测定大鼠肝脏、骨骼肌中PKKB、GSK-3β、GLUT-4、ERK1/2、p38MAPK磷酸化蛋白及总蛋白的表达,RT-PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌中GLUT-4、ERK1/2、p38 MAPK mRNA的表达,从而探讨IGT的发病机制及温胆汤、加味温胆汤的作用靶点。结果:(1)肝脏组织:空白对照组肝细胞形态清晰,细胞质、细胞核染色均匀,肝板排列规整;IGT模型组大鼠出现细胞核固缩,细胞质染色不均匀,呈现脂肪变性,散在少量炎性细胞;与模型组比较,给药组肝细胞形态比较规整,有的肝窦清晰可见,存在少量细胞核固缩。骨骼肌组织::空白对照组大鼠骨骼肌的肌束排列整齐,细胞核位于肌束边缘,成扁平状,无炎性细胞存在;IGT模型组大鼠骨骼肌染色不均匀,肌纤维排列不规整,部分细胞嗜酸性增强,细胞核固缩;给药组肌纤维排列比较规整,细胞核固缩较少,肌纤维紧密。脂肪组织:空白对照组脂肪细胞大小比较均匀,形态清晰规整,染色均匀;IGT模型组脂肪细胞染色不均匀,形态不规则,细胞核固缩,毛细血管明显增多,有散在红细胞存在;与IGT模型组比较,给药组脂肪细胞染色较均匀,形态相对清晰规整,细胞核固缩较少,毛细血管明显减少,少数红细胞存在。(2)与空白对照组比较,IGT模型组大鼠骨骼肌中PI3K、PKB、GLUT-4蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05),GSK-3β蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05),温胆汤、加味温胆汤均可以显著升高大鼠骨骼肌中PI3K、PKB、GLUT-4蛋白表达(P<0.01或P<0.05),降低GSK-3β蛋白表达(P<0.01或P<0.05);与空白对照组比较,IGT模型组大鼠肝脏组织中PI3K、GLUT-4蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05),PKB、GSK-3β蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05),温胆汤、加味温胆汤均可以显著升高大鼠肝脏中PI3K、GLUT-4蛋白表达(P<0.01或P<0.05),降低PKB蛋白表达,对GSK-3β蛋白表达无调节作用。(3)与空白对照组比较,IGT模型组大鼠骨骼肌中ERK1/2、p38 MAPK蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05),温胆汤、加味温胆汤均可以显著升高ERK1/2、p38 MAPK蛋白表达(P<0.01或P<0.05);与空白对照组比较,IGT模型组大鼠肝脏中ERK1/2蛋白表达无显著性差异,p38 MAPK蛋白表达显著升高(P<0.01);温胆汤可以显著降低ERK1/2、p38 MAPK蛋白表达(P<0.01),而加味温胆汤却可显著升高ERK1/2、p38MAPK蛋白表达(P<0.01)。(4)与空白对照组比较,IGT模型组大鼠骨骼肌中ERK1/2、p38MAPK、GLUT-4 mRNA表达显著升高(P<0.01),而温胆汤、加味温胆汤均可以显著降低IGT大鼠骨骼肌中ERK1/2、p38 MAPK、GLUT-4 mRNA表达;与空白对照组比较,IGT模型组大鼠肝脏中ERK1/2、p38 MAPK、GLUT-4 mRNA表达显著降低(P<0.01),而温胆汤、加味温胆汤均可以显著升高IGT大鼠肝脏中ERK1/2、GLUT-4 mRNA表达(P<0.01或P<0.05),加味温胆汤还可以显著升高 p38 MAPK mRNA 表达(P<0.05)。结论:长期高脂饮食可以建立符合人类标准的IGT大鼠动物模型,其胰岛素受体后信号通路传导出现障碍,PI3K、MAPK通路一些关键蛋白、基因出现异常表达,而温胆汤、加味温胆汤均可以显著调节其异常表达,但两方的作用靶点和对蛋白的调节作用也存在着差异。