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胃癌是全球常见的恶性肿瘤之一,也是威胁我国人民生命健康的主要疾病之一。据2015年中国癌症数据统计显示,胃癌在我国的发病率和致死率在所有癌症中排第二。虽然胃癌的发生率在近几年有所下降,外科手术治疗、化疗等手段的介入也一定程度上提高了患者生存率,但是尚不明确的分子机制限制了这些治疗手段的进一步发展,胃癌患者的预后仍不容乐观,其发生发展机制亟待进一步的研究。蛋白质精氨酸甲基转移酶 5(Protein arginine methyltransferase 5,PRMT5)可以催化组蛋白和非组蛋白的精氨酸残基对称性双甲基化,参与调控多项生命进程。与正常组织相比,PRMT5在淋巴癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌等多种癌症组织中高表达。为了解PRMT5在胃癌组织中的表达情况,我们通过免疫组织化学染色实验分析了 PRMT5在癌旁组织及胃癌组织中的表达量。结果表明,与癌旁组织比较在胃癌组织中PRMT5的表达上调。为了进一步探索PRMT5对胃癌细胞的生物学行为的影响,我们用特异的siRNA干扰胃癌SGC7901细胞中PRMT5的表达。通过CCK-8、EdU和克隆形成实验发现,干扰PRMT5表达后能够显著抑制胃癌SGC7901细胞的增殖。为了进一步验证PRMT5在生物体内对胃癌细胞生长的影响,我们又进行了裸鼠皮下成瘤实验。结果显示,干扰PRMT5的表达在体内能显著抑制胃癌细胞的生长。为了探明PRMT5参与胃癌细胞增殖的具体机制,我们用Real-time PCR的方法在干扰PRMT5表达后的胃癌细胞中对与细胞增殖和周期密切相关的基因进行初步筛选。发现PRMT5可以负调控PTEN等基因的表达。PTEN作为一个的重要的抑癌基因,对维持正常细胞活动和功能至关重要,多项研究表明其在多种人类肿瘤中发生缺失或者突变。为验证PRMT5调控PTEN的具体机制,我们在胃癌SGC7901细胞中干扰PRMT5的表达后,用Western blot实验检测了 PTEN蛋白表达的变化,发现干扰PRMT5的表达后PTEN蛋白表达显著上调。为验证PRMT5对PTEN可能存在的直接调控作用,我们又用染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)的方法检验了 PRMT5 在 PTEN 基因启动子的结合情况,实验结果显示PRMT5能够与PTEN基因启动子相结合。再通过ChIP检验了干扰PRMT5表达后其表观修饰标志H4R3me2s在PTEN启动子上的富集情况,实验结果表明干扰PRMT5的表达后H4R3me2s在PTEN启动子上的富集明显减少。以上结果表明PRMT5对PTEN基因的表达起着直接调控的作用。进一步病理标本的免疫组织化学染色实验和相关性分析也显示了 PRMT5和PTEN表达呈负相关。这些实验结果表明PRMT5可以通过对PTEN基因的表达调控促进胃癌细胞增殖。综上,我们通过对临床样本的分析以及体内、体外实验研究了 PRMT5在胃癌发生发展中的作用,探讨了 PRMT5调控PTEN基因表达的分子机制。这些研究为胃癌的诊断和治疗提供了新的策略和理论依据。