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目的:1.研究Spata2在正常大鼠脑中的表达与分布情况;2.研究Spata2在局灶性短暂脑缺血/再灌注大鼠脑内表达的时间和空间分布规律;3.研究Spata2沉默对大鼠局灶性短暂脑缺血/再灌注后脑炎症的影响;4.研究Spata2沉默影响大鼠局灶性短暂脑缺血/再灌注后脑炎症的可能机制。方法:1.利用实时定量多聚合酶链反应（q RT-PCR）和蛋白质免疫印迹（Western Blot）检测Spata2的m RNA和蛋白在正常SD大鼠的各脑区（前额叶、全皮质、海马和小脑）以及睾丸中的表达与分布情况。利用免疫荧光研究SPATA2的亚细胞定位以及与CYLD的共表达情况;2.通过简单随机分组法将SD大鼠分为假手术（Sham）组和短暂脑中动脉梗塞/再灌注手术（t MCAO/R）组。利用线栓法建立局灶性短暂脑缺血/再灌注动物模型。利用q RT-PCR和Western Blot在脑缺血/再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h和72 h检测Spata2在梗死周围区皮质的表达情况。利用q RT-PCR在脑缺血/再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h和72 h检测TNF-α,IL-1β和IL-18的在脑皮质的表达情况。利用免疫荧光在脑缺血/再灌注后24 h检测SPATA2与Neu N、GFAP和Iba-1的共表达情况;3.通过脑皮质原位注射慢病毒沉默Spata2的表达。利用简单随机分组法将SD大鼠分为sham（假手术组）、t MCAO/R（短暂大脑中动脉梗塞/再灌注手术+慢病毒空载）、短暂大脑中动脉梗塞/再灌注手术+慢病毒空载（t MCAO/R+LV-scramble）短暂大脑中动脉梗塞/再灌注手术组+Spata2沉默（t MCAO/R+LV-sh Spata2）组。在缺血/再灌注24 h后,利用Garcia神经评分评价大鼠的神经功能缺损情况。利用TTC染色观察大鼠脑梗塞体积;4.利用简单随机分组法将SD大鼠分为sham、t MCAO/R、t MCAO/R+LV-scramble和t MCAO/R+LV-sh Spata2四组。在缺血/再灌注24 h后,利用q RT-PCR检测TNF-α,IL-1β和IL-18的在脑皮质的表达情况。利用免疫荧光检测Iba-1阳性细胞数。利用Western Blot检测CYLD、p-IκBα、t-IκBα、p-P65、t-P65、p-JNK、t-JNK、p-P38、t-P38和NLRP3的表达情况。结果:1.Spata2在正常SD大鼠的各脑区和睾丸均有表达。Spata2的蛋白在细胞核和细胞浆均有表达。SPATA2与CYLD共表达。2.在大鼠大脑梗死周围区的皮质中,Spata2主要表达于神经元,少量表达于小胶质细胞,未见星形胶质细胞中有表达。与sham组相比,Spata2的表达在t MCAO/R组呈现降低的趋势。其m RNA表达在缺血/再灌注后的5个时间点均显著降低（在6 h、24 h、48 h和72 h,P<0.01,在12 h,P<0.01）;其蛋白表达在脑缺血/再灌注后24 h和48 h显著降低（P<0.01）。t MCAO/R组的TNF-α和IL-1β的m RNA的表达呈现逐渐降低的趋势,在在脑缺血/再灌注后6 h、12 h、24 h和48 h均显著高于sham组（TNF-α在6 h和24 h,P<0.01,在12 h和48 h,P<0.05;IL-1β在6 h、12 h和24 h,P<0.01,在48 h,P<0.01）。IL-18的m RNA的表达在sham组与t MCAO/R组之间没有明显差异。3.慢病毒介导的sh RNA在m RNA和蛋白水平显著降低Spata2的表达（P<0.01）。在大鼠局灶性短暂脑缺血/再灌注后24 h,t MCAO/R+LV-sh Spata2组的Garcia神经评分显著低于其它三组（P<0.05）,梗死体积显著高于其它三组（P<0.01）。t MCAO/R与t MCAO/R+LV-scramble两组在梗死体积和Garcia神经评分两方面没有明显差异（P>0.05）。4.在大鼠局灶性短暂脑缺血/再灌注后24 h,t MCAO/R+LV-sh Spata2组的TNF-α和IL-1β的m RNA表达量显著高于其余三组（P<0.01）,IL-18的m RNA表达量显著高于t MCAO/R组或t MCAO/R+LV-scramble组（P<0.01）,但是和sham组无显著差异（P>0.05）。t MCAO/R+LV-sh Spata2组的Iba-1阳性细胞计数显著高于其余三组（P<0.01）。t MCAO/R与t MCAO/R+LV-scramble两组在炎症因子的m RNA表达量以及Iba-1阳性细胞计数方面没有明显差异（P>0.05）。5.在大鼠局灶性短暂脑缺血/再灌注后24 h,与sham组相比,t MCAO/R或t MCAO/R+LV-scramble组的IκBα和P65的磷酸化比例更高（P<0.01）。t MCAO/R+LV-sh Spata2组的IκBα和P65的磷酸化比例显著高于其余三组（P<0.01）。JNK的磷酸化比例在sham、t MCAO/R、t MCAO/R+LV-scramble和t MCAO/R+LV-sh Spata2四组之间没有明显差异（P>0.05）。t MCAO/R+LV-sh Spata2组的P38的磷酸化比例显著高于其余三组（P<0.01）。P38的磷酸化比例在t MCAO/R、t MCAO/R+LV-scramble和t MCAO/R+LV-sh Spata2三组之间没有明显差异（P>0.05）。t MCAO/R+LV-sh Spata2组的NLRP3的表达量显著高于t MCAO/R或t MCAO/R+LV-scramble组（P<0.01）。NLRP3的表达量在t MCAO/R、t MCAO/R+LV-scramble和t MCAO/R+LV-sh Spata2三组之间没有明显差异（P>0.05）。结论:Spata2沉默加重局灶大鼠局灶性短暂脑缺血/再灌注后的炎症反应,使预后变差。其机制可能与P38MAPK和NLRP3炎症小体通路的激活以及NF-κB通路的过度激活有关。因此,Spata2在局灶性短暂脑缺血/再灌注的炎性损伤中发挥保护性的作用。