油茶炭疽病生防菌剂Y13的研制及应用

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油茶内生拮抗菌Y13是一株对油茶炭疽病原菌具有较强的抑制效果的细菌,该菌经鉴定为枯草芽孢杆菌。为开发该菌株作为生防菌剂,本文主要开展Y13菌株发酵条件、菌剂可湿性粉剂加工工艺,定殖能力及林间应用研究。主要研究结果如下:(1)生防细菌Y13菌株发酵条件的优化采用单因素实验和正交优化实验,确定了Y13发酵培养的最佳培养基配方为:葡萄糖2.0%,酵母膏1.0%,牛肉膏0.3%,NaCl浓度为1.5%;最佳发酵条件为:温度30℃,初始pH 6~7,摇瓶装液量为50 mL/250mL,接种量5%,摇床转速160 r/min,发酵周期36 h。(2)生防细菌Y13菌株可湿性粉剂的研制通过测定润湿时间、悬浮率及热稳定性得到了Y13可湿性粉剂的较佳组合为硅藻土、STPP、SDBS。采用L9(34)正交表安排实验,结果表明,Y13菌株可湿性粉剂的最佳配方为:硅藻土37.17%,STPP 4.13%,SDBS8.26%,腐植酸0.41%,Y13原粉50%。对Y13菌株可湿性粉剂的质量指标进行了测定,其含水量、润湿时间、pH值、细度悬浮率等指标达到了有关国家标准。菌株Y13经急性经口毒性实验和急性经皮毒性试验,小白鼠均无明显中毒表现。连续观察14d,小白鼠无死亡发生,说明生防细菌菌株Y13为微毒性。(3)生防菌剂Y13定殖及林间应用研究通过耐利福平标记菌株回收,研究其在油茶叶片和果实上的定殖能力及其影响因素。研究表明,该拮抗菌能在油茶叶部和果部良好定殖。较高的菌悬液浓度(>108cfu/mL),无炭疽病原菌干扰,温度较高(25℃~35℃)、湿度较大(RH95%-100%)对该拮抗菌的定殖有利。对油茶炭疽病进行了林间防治试验,结果表明:生防菌剂对油茶炭疽病有较好的防治效果(70%左右),与对照药剂百菌清的防治效果相当。
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