BUD2(Bushy and Dwarf):编码一个拟南芥生长发育必需的S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶

来源 :中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hy1330
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我们利用正义/反义RNA表达(senseandantisenseRNAexpression,SARE)系统,从拟南芥中筛选到一个半矮化分枝突变体bud2(bushyanddwarf),Southern及PCR结果表明,在bud2的基因组中存在大约75kb的DNA片段缺失,用基因组DNA与跨越此缺失区段的两个BAC克隆DNA进行的纤丝荧光原位杂交结果证明了这一点。缺失区段里的一个预测的S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)基因可以互补bud2以及其基因的一个等位突变salk007279的表型。研究发现在这两个突变体里,胺类的比例发生改变,乙烯释放增加,说明BUD2可能就是SAMDC基因。BUD2的cDNA转化到SAMDC功能丧失的酵母突变株spe2里,可以互补该突变株的生长缺陷,表明BUD2确实编码一个S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶。 BUD2在拟南芥的各个器官都具有同样水平的表达,明显不同于其它三个同源SAMDC基因的表达模式,说明它可能维持着一个基础的SAMDC活性。同时发现,BUD2(SAMDC4)的表达在SAMDC1的一个突变株salk020185中受到很强的诱导,暗示BUD2可以部分替代SAMDC1的功能,两者间可能有功能上的叠加作用。转基因结果表明,异位过量表达BUD2,也会造成植株生长发育受阻,说明过强的SAMDC活性对植物是有害的。显微镜下观察茎,叶柄及根的切片,发现突变体及转基因植株的维管束发育受到了影响,木质化的细胞显著增多,用组织化学染色的方法对茎及根进行染色,得到了同样的结果。这些结果表明BUD2在拟南芥的生长发育中起着重要的作用。 bud2(samdc4)与salk020185(samdc1)进行杂交,得到的双突变体胚胎发育严重缺陷,细胞分裂迟缓,不能正常分化而导致胚胎最终死亡,说明BUD2及SAMDC1对胚胎的正常发育是必不可少的,同时说明多胺在植物的生长发育过程中可能起着非常重要的作用。
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