钙调神经磷酸酶(calcineurin，CN)是目前所知唯一一种活性受Ca2+/CaM调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶，在机体内神经、免疫、心肌重构等生命活动中发挥着重要的作用，CN活力的水平直接影响其在体内的调节作用，并直接与一些重大疾病的发生密切相关，因此研究CN活性的调节因子及其对CN活性调控的机制具有十分重要的意义。　　 环孢菌素A(CsA，cyclosporinA)是CN的特异性专一性抑制剂，是研究体内外CN活力的经典工具药。　　 RCANs(regulators of calcineurin，RCANs)是CN的一类内源调节因子，其家族成员RCAN1-1L和RCAN1-4等在体内能够通过不同的方式对CN的活性起到调节作用。近来研究发现，AD病人脑中的RCAN1-1L高表达，说明该调节因子可能与CN依赖的生理和病理过程的调控密切相关。因此针对RCANs关于CN的调控作用的研究具有十分重要的理论和实践意义。　　 铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase，SOD1)是细胞内主要的抗氧化酶，能够有效地清除体内的自由基，是机体内抗过氧化损伤的一道重要防线。而有研究报道，SOD1在体内体外均能对CN的活性起到保护作用，表明CN同时也受氧化应激作用的调节。　　 首先，我们建立起了以RII为底物的孔雀绿比色反应法，来测定细胞和组织中CN活力。经过优化后的测活流程，能够反映细胞和组织中的CN活力及其变化情况，为今后的实验数据的准确性打下基础。在此基础上，进一步以CsA作为工具药试图建立CN活力受损的细胞和动物模型，并通过观察调节CN活力的内源调节因子RCAN1以及SOD1的变化，探讨了CN活力受损的不同机制。结果发现在20mg/kgCsA处理25天后的小鼠脑中RCAN1-1L和RCAN1-4发生显著过表达，而SOD1蛋白量显著下降，而小鼠脑中CN的抑制率也达到了67.5％。综合文献报道的CsA体内动力学数据，说明CsA虽然不能直接进入脑组织中抑制CN活力，但可通过对RCAN1的调节和造成氧化损伤来引起脑中CN活力的下降。在细胞水平上，用不同浓度的CsA孵育SY5Y细胞1h后，检测到CN活力受到明显抑制，最大抑制率达到82％；与对照组相比，不同给药组的RCAN1-1mRNA的表达并无明显变化；同时，蛋白印迹实验没有检测到RCAN1-1L的表达；SOD1的蛋白印迹试验显示，给药组SOD1的表达显著下降。因此，细胞模型中CN活力的下降不同于动物模型，CsA主要是通过直接作用于CN以及影响氧化还原状态来抑制CN活性。　　 另外，我们利用体外测活方法筛选了类黄酮类的多种单体化合物，初步确定了对CN活力有激活作用的芦丁，希望将来能用于AD疾病治疗的研究。