玉米弯孢霉叶斑病菌种间生理与遗传分化

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:wjz5201
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本研究对31个玉米弯孢霉菌株进行了鉴定,并利用4个典型玉米弯孢霉的种对生产中常用的自交系和杂交种进行了致病性测定,通过比较寄生适合度的差异,得出4种弯孢霉的致病能力大小顺序为新月弯孢(Curvularia lunata)>中隔弯孢(C.intermedia)>棒状弯孢(C.clavata)>画眉草弯孢(C.eragrostidis),即新月弯孢的致病性最强,符合在自然界中优势种群的事实。不同自交系和杂交种之间在潜育期、病斑数量、病斑大小、产孢量等方面均表现有明显的差异,具有水平抗性的特征。 利用玉米根冠细胞死亡法测定了玉米弯孢霉毒素的生物毒性,方法简单可行。不同浓度下,弯孢霉毒素均可以使不同抗病性的玉米叶片电解质外渗;且电解质外渗的程度与毒素浓度和处理时间呈正比。强致病性菌株毒素对抗病品种的影响高于弱致病性菌株。 研究发现,玉米弯孢霉种间的致病性分化、产毒差异及同工酶多态性之间有着某种内在联系。同工酶分析发现,酯酶同工酶一条Rf=0.57的公共谱带强弱与菌株致病性有相关性,可作为衡量弯孢霉致病性强弱的一个指标。 本试验建立了一套较为优化的RAPD反应体系及PCR反应程序。即,反应体系为:5U/μLTaq DNA聚合酶0.25μL,10×PCR buffer 2.5μL,2.5mM dNTP 2μL,10μM随机引物2μL,10ng/μL模板DNA 5μL,无菌超纯水补足至25μL。反应程序为95℃预变性3min;94℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸2min,40个循环;72℃延伸5min,4℃保存。 用23个引物对供试弯孢霉31个菌株进行了PCR扩增,每个引物所扩增的条带数为5-12条,共扩增出208个RAPD标记,其中多态性标记155个,多态性几率74.5%,通过RAPD分析,除新月弯孢外,同种的弯孢霉菌株都有很高的相似性而聚类在一起,不同菌株中的新月弯孢相似性变化很大。
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