广东省集约化猪场伪狂犬病的净化研究

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伪狂犬病(Pseudorabies,PR),是由伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)引起的急性病毒性传染病。多种动物都可感染PRV,但是猪是PRV的自然宿主且易感性最高,发病也最严重。感染仔猪表现为体温升高、神经症状、生长缓慢及高死亡率,怀孕母猪一般表现流产、死胎、木乃伊胎,健康猪和病猪、带毒猪接触后都可感染本病,成年猪一般不表现症状。本病在全国各地广泛存在,是最重要的猪的传染病之一,一旦发病很难根除。广东省伪狂犬病流行也普遍存在多地猪场,严重制约了省内养猪业的发展,造成巨大损失。为控制伪狂犬病的传播,提高猪场养殖效益,本试验从流行病学调查、制定净化方案、猪场净化实施等几个方面对猪伪狂犬病的净化进行研究实验。本论文采用广东四家猪场为试验场做以下研究。通过对广东省潮州、湛江、云浮、清远四地四家猪场用ELISA抗体检测试剂盒(gE抗体)对猪场的血清采取抽检用以确定PR gE抗体是否为阳性,进行PR流行病学的调查;四家被调查猪场抽检采集的血清检测抗体后,得出其净化前gE抗体阳性率在10~35%之间,有较高的阳性率。本实验还采集了病料及鼻拭纸,同时检测抗原阳性率,研磨溶解后滤膜除菌后利用Vero细胞进行病原分离,采用PCR方法对PRV的DNA进行扩增并送往测序,并利用MegAlign生物软件进行同源性分析,选取两株毒命名为PRVHN-1和PRVHN-2株,结果显示PRVHN-1和PRVHN-2的gE基因同源性达到98.3%。与SA株差异性较大,同源性为44.2%和50.0%;与其他gE基因同源性在96.9%-99.7%之间,通过进化树和同源性比对分析可知选取的两株代表毒株分别与Mink1和NYHY中国毒株亲缘关系较近的野毒株。在净化措施上,而通过借鉴国内外净化PR成功的经验进行总结分析,制定的免疫-检疫-淘汰净化策略,各场采用如下措施:利用PR灭活苗对PR gE抗体阳性率高于10%的猪场进行集中免疫,而低于10%的猪场采取检疫-淘汰,到猪场阳性率连续两年较低时,全场改用基因缺失灭活苗进行免疫,并进行了每季度对母猪群进行药物保健、对现有保育猪进行清群,消毒并空栏、全场带猪消毒、仔猪断奶后直接转入生长舍且做好保温等综合防控措施。试验在2015-2017两年多时间严格执行PR净化方案最终使4个猪场PR gE抗体阳性达到0%,而PCR抗原阳性率控制在1%以下,基本清除PRV抗原,目前猪场内各项指标数据已经趋于稳定,PR抗原阳性率、母猪发病率和仔猪死亡率均得到控制,最终达到基本清除PR抗原抗体阳性率,提升猪场生产成绩,增加猪场经济效益的效果,表明本试验在试验猪场取得成效,并为国内的伪狂犬病净化提供参考,值得各猪场借鉴方案。
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