【摘 要】
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单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种普遍的食源性致病菌,经常会在食品和食品加工设备中以生物被膜的形式存在,严重危害了食品安全以及人类健康,因此控制
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单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种普遍的食源性致病菌,经常会在食品和食品加工设备中以生物被膜的形式存在,严重危害了食品安全以及人类健康,因此控制L.monocytogenes的生长及生物被膜的形成是食品生产过程的一个重要问题。本文研究了Lactobacillus plantarum Y42培养上清液中的粗蛋白对L.monocytogenes生物被膜形成的抑制作用。首先利用20%、40%、50%、60%、70%和80%的硫酸铵盐析L.plantarum Y42菌株MRS培养上清液,分级沉淀得到6个粗蛋白组分,通过结晶紫染色法测定6个粗蛋白组分对L.monocytogenes生物被膜形成的抑制效果。得出50%、60%、70%和80%硫酸铵盐析获得4个粗蛋白组分可以抑制L.monocytogenes生物被膜的形成(p<0.05)。其次L.plantaum Y42培养上清液中50%、60%、70%和80%硫酸铵盐析获得4个粗蛋白组分,通过降低L.monocytogenes的运动性以及胞外蛋白、胞外多糖和胞外DNA的分泌来干扰L.monocytogenes生物被膜的形成。同时50%、60%、70%和80%硫酸铵盐析获得4个粗蛋白组分可抑制L.monocytogenes在HT-29细胞上的黏附,减少L.monocytogenes刺激HT-29细胞产生白介素-8的表达量。选用环丙沙星和左氧氟沙星测定浮游态和生物被膜态L.monocytogenes的抗生素敏感性差异,50%、60%、70%和80%硫酸铵盐析获得4个粗蛋白组分可以降低环丙沙星、左氧氟沙星对生物被膜态L.monocytogenes的最小生物膜清除质量浓度(Minimum biofilm eradicate concentration,MBEC)。综上,L.plantaum Y42培养上清液的粗蛋白可以抑制L.monocytogenes生物被膜的形成,通过破坏生物被膜,使膜内部的菌体对抗生素的敏感性增强;通过降低L.monocytogenes的爬行运动性、降低L.monocytogenes分泌胞外DNA、胞外蛋白和胞外多糖、抑制L.monocytogenes在HT-29细胞上的黏附、减少L.monocytogenes刺激HT-29细胞产生白介素-8的表达量来减少L.monocytogenes形成生物被膜的量。
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