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三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)是我国特有的淡水良种育珠贝,易受病害威胁而遭受重大经济损失,开展三角帆蚌免疫相关基因研究具有十分重要的现实意义。本研究采用RACE技术,对高通量转录组测序所获得的三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)热休克蛋白70(HSP70)、肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP8)、干扰素诱导的鸟苷酸结合蛋白1(GBP1)与Toll样受体2(TLR2)基因的长片段进行扩增,拼接得到这四种免疫相关基因的cDNA序列全长,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术研究了HcHSP70和HcTNFAIP8基因在各组织中的表达分布情况及其应激表达情况,并采用Western-blot技术从蛋白质水平研究温度刺激对HcHSP70表达的影响。HcHSP70基因cDNA序列全长2298 bp,开放阅读框为1974 bp,编码657个氨基酸,预测蛋白分子量大小为71.6 kDa。含有三个HSP70家族典型的标签序列,末端保守区域EEVD以及典型的重复位点GGXP。与其他物种HSP70同源性很高,最高达91%,通过构建系统进化树发现Hc HSP70与其它4种软体动物HSP70聚为一支。HcHSP70在肝胰腺中表达量最高,其次是性腺,而在鳃、外套膜及肌肉中的表达量较低。实时荧光定量PCR和Western-blot技术显示,鳃组织中HcHSP70 mRNA和蛋白的表达量随水温上升而上调,37℃时表达量显著上升到最高值,而40 ℃时表达量恢复至正常水平。HcTNFAIP8基因cDNA序列全长1179 bp,开放阅读框为573 bp,编码190个氨基酸,预测分子量大小为23.64 kDa。HcTNFAIP8与长牡蛎CgTNFAIP8相似性最高为71%,且在系统进化树的同一个分支上。实时荧光定量PCR结果显示:HcTNFAIP8在性腺中表达量最高,其次为肝胰腺,而在鳃、外套膜及心脏中表达量较低;HcTNFAIP8的表达并不受PGN的诱导影响,而在LPS刺激后,HcTNFAIP8表达量出现先显著下调再上调情况,最终恢复接近到正常值。HcGBP1基因cDNA全长为2418 bp,开放阅读框为1947 bp,编码648个氨基酸,预测分子量大小为76.28 kDa。同源序列比对发现HcGBP1与非洲爪蟾GBP1处于同一个大分支中;HcTLR2基因cDNA序列全长1177 bp开放阅读框为1032 bp,编码343个氨基酸,预测分子量大小为39.58 kDa,同源序列比对发现发现三角帆蚌与马氏珠母贝聚为一支。