背景：　　随着人口老龄化的进程，骨质疏松症的发生率逐年上升，严重影响老年人的健康。虽化学药物制剂疗效确切，但是长期使用毒副作用大，且主要以抑制骨吸收为主。应该寻求更加有效而安全的抗骨质疏松药物。大量研究表明，理想的抗骨质疏松药物应该是既能够抑制骨吸收，又能够促进骨的形成，且副作用少，价格便宜。“健步虎潜丸”出自《伤科补要》卷三，其疗效已经为长期临床所证实。　　目的：　　研究健步虎潜丸对体外成骨样细胞增殖及功能影响,并进一步研究其对去卵巢大鼠骨质疏松症的预防作用。本研究拟为开发新型有效的防治骨质疏松症药物奠定基础,促进防治骨质疏松症复方中药的现代化和国际化。　　材料与方法：　　1.24只成年雌性SD大鼠随机分为健步虎潜丸组低剂量组、中剂量组、高剂量组及生理盐水组，并分别以含生药1.5g/kg、3g/kg、6g/kg的健步虎潜丸及等体积的生理盐水灌胃，每天2次，连续给药1周。以各组血清分别处理成骨样细胞24、48、72小时，观察细胞形态学，同时对细胞增殖能力进行测定。　　2.24只成雌性SD大鼠随机分为健步虎潜丸组低剂量组、中剂量组、高剂量组及生理盐水组，并分别以含生药1.5g/kg、3g/kg、6g/kg的健步虎潜丸及等体积的生理盐水灌胃，每天2次，连续给药1周。各组血清分别处理成骨样细胞24、48、72小时，对碱性磷酸酶染色的细胞进行形态学观察，同时对碱性磷酸酶活性进行测定。　　3.70只成年雌性SD去卵巢大鼠随机分为健步虎潜丸组低剂量组、中剂量组、高剂量组、生理盐水组及阿仑磷酸钠组，并分别以含生药1.5g/kg、3g/kg、6g/kg的健步虎潜丸、等体积的生理盐水灌胃、1mg/kg阿仑膦酸钠灌胃，健步虎潜丸各组及生理盐水组每天灌胃2次，阿仑磷酸钠组每天灌胃1次。16周后进行血清酶学、影象学、骨密度、骨显微形态计量学、生物力学及组织学的检测。　　结果：　　1．健步虎潜丸含药血清对ROS17/2.8成骨样细胞形态影响：从24小时开始健步虎潜丸低剂量组、健步虎潜丸中剂量组及健步虎潜丸高剂量组的细胞密度高于对照组,核分裂相多见,细胞重叠生长,分泌物多,基质堆积明显,健步虎潜丸高剂量组细胞改变尤为显著。　　2．健步虎潜丸含药血清对ROS17/2.8成骨样细胞增殖能力：实验各组内的MTT值24h、48h、72h逐渐增加，结果具有统计学意义。24h、48h、72h各干预组较对照组MTT值明显增加，具有有显著性差异。24h时健步虎潜丸中、高剂量组较低剂量组MTT值明显增加，具有有显著性差异；24h时虎潜丸中、高剂量组MTT值没有显著性差异。48h、72h时各干预组组间比较，随干预剂量增加，MTT值增加，结果具有统计学差异。　　3．ROS17/2.8成骨样细胞的碱性磷酸酶染色：24h、48h时，各干预组及对照组碱性均磷酸酶染色阳性，但各浓度干预组细胞内的碱性磷酸酶染色肉眼未见明显差异。72h时，各不同浓度干预组及正常组其ROS17/2.8成骨样细胞内碱性均为磷酸酶染色阳性,对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组碱性磷酸酶着色逐渐加深。　　4．健步虎潜丸含药血清对ROS17/2.8成骨样细胞碱性磷酸酶活性：随着时间增加，实验各组内的MTT值碱性磷酸酶活性值逐渐增加，结果具有统计学意义；24h、48h、72h各干预组较对照组MTT值明显增加，具有有显著性差异。24h、48h、72h时各干预组组间比较，随干预剂量增加，碱性磷酸酶活性值逐渐增加，结果具有统计学差异。　　5.大鼠血清骨钙素：与卵巢切除对照组相比，健步虎潜丸各剂量组骨钙素水平显著升高，结果具有统计学差异，阿仑膦酸钠组骨钙素水平水平显著降低，结果具有统计学差异。健步虎潜丸各剂量组随剂量增加，骨钙素水平有升高的趋势，但结果无统计学差异。和阿仑膦酸钠组相比，各剂量组骨钙素水平显著升高，结果具有统计学差异。　　6.酒石酸酸性磷酸酶5b（TRAP-5b）：与卵巢切除对照组相比，各药物治疗组酒石酸酸性磷酸酶5b水平显著降低，结果具有统计学差异。健步虎潜丸各剂量组随剂量增加，酒石酸酸性磷酸酶5b有降低的趋势，但结果无统计学差异。和阿仑膦酸钠组相比，健步虎潜丸各剂量组的酒石酸酸性磷酸酶5b无统计学差异。　　7.影象学检查：对照组其骨皮质薄，边缘模糊，松质骨的透光度较高，各药物干预组较对照组相比股骨的骨皮质更厚，松质骨透光度更低。　　8.骨密度：与卵巢切除对照组相比，各药物干预组股骨和腰椎骨密度显著增加，结果具有统计学差异；各药物干预组组间相比，股骨和腰椎骨密度没有统计学差异。　　9.三点弯曲实验：与卵巢切除对照组相比，各药物干预组股骨最大负荷显著增加，结果具有统计学差异；健步虎潜丸各剂量组组间相比，股骨最大负荷无统计学差异；与阿仑膦酸钠组相比，健步虎潜丸各剂量组股骨最大负荷显著增加，结果具有统计学差异。与卵巢切除对照组相比，各药物干预组股骨最大负荷下形变有增高趋势，但是结果均没有统计学差异；与阿仑膦酸钠组相比，健步虎潜丸各剂量组最大负荷有增高趋势，结果没有统计学差异。　　10.腰椎压缩实验：与卵巢切除对照组相比，各药物干预组腰椎最大载荷显著增加，结果具有统计学差异。健步虎潜丸各剂量组组间相比，腰椎最大载荷无统计学差异。与阿仑膦酸钠组相比，健步虎潜丸各剂量组腰椎最大载荷显著增加，结果具有统计学差异。　　11.骨形态计量学：与卵巢切除对照组相比，各药物干预组Tb.Ar、Tb.N显著增加，Tb.Sp显著降低，结果具有统计学差异；Tb.Th没有统计学差异。各药物干预组组间Tb.Ar、Tb.N、Tb.Sp、Tb.Th没有统计学差异。　　12.组织学显示：腰椎HE、Masson染色及股骨HE、Masson染色显示各干预组骨小梁排列密集,小梁厚度宽、间距小,骨小梁之间的连接较多；而卵巢切除对照组骨小梁排列稀疏,数目减少,小梁明显变细、间距加宽,骨小梁结构出现较大的空白区域。　　结论：　　1.健步虎潜丸含药血清能促进成骨样细胞ROS17/2.8的增殖且存在浓度依赖性及时间依耐性。　　2.健步虎潜丸含药血清能促进成骨样细胞的活性且存在浓度依赖性及时间依耐性。　　3.健步虎潜丸各剂量组均能改善去卵巢大鼠的骨转换指标，有效促进骨形成，抑制骨吸收。　　4.健步虎潜丸各剂量组均能有效增加去卵巢大鼠腰椎和股骨BMD。　　5.健步虎潜丸各剂量组改善去卵巢大鼠的腰椎及股骨的生物力学性能，可降低去势大鼠骨质疏松骨折风险。　　6.健步虎潜丸各剂量组均能改善去卵巢大鼠骨骼微观结构，以提高骨质量。　　7.健步虎潜丸各剂量组组织学观察骨小梁排列更密集,小梁厚度更宽、间距更小,骨小梁之间连接增加。　　8.健步虎潜丸各剂量组和阿仑膦酸钠组对与骨量和骨质量相关的各项指标有明显改善，除骨形成指标改善和剂量相关外，各干预组间无明显的统计学差异。