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柑橘皮渣发酵饲料是柑橘加工业的主要副产物,经过黑曲霉和酵母菌的混合菌发酵后制成的饲料,是中国农科院柑橘研究所首创的一种新型饲料。其含有丰富的维生素、矿物质、类黄酮、类胡萝卜素、氨基酸等,改善了柑橘皮渣适口性,它既能作全价牛饲料,又能作其它畜牧饲料的添加剂。本文从柑橘皮渣发酵饲料替代部分精饲料饲喂奶牛及柑橘皮渣发酵饲料提取物溶液抑菌作用的角度,研究了饲喂柑橘皮渣发酵饲料后奶牛产奶量、乳质量、乳体细胞数的变化,研究了柑橘皮渣发酵饲料提取物溶液抑菌谱、粗提物溶液的提取工艺、有效活性成分的初步鉴定及抑菌活性,主要研究结果如下:
1.通过柑橘皮渣发酵饲料替代部分精饲料饲喂奶牛试验,结果表明:可显著提高产奶量,乳脂率、乳蛋白率、乳糖以及干物质含量变化不大。对于过泌乳高峰期的高产牛柑橘皮渣发酵饲料可代替混合精料最佳值是12.5％,每一头牛每一天可增产奶量44.3g,乳脂率有所下降但下降极小,乳蛋白有所上升亦上升幅度很小,对乳糖、干物质无影响;对于泌乳高峰期高产牛最佳值是11.25％,每一头牛每一天可增产奶量134g,乳脂率、乳蛋白、乳糖、干物质都无明显变化:对于低产牛最佳值是18.75％,每一头牛一每天可增产奶量134g,乳脂率、乳蛋白、乳糖、干物质都无明显变化。
2.通过检测样乳中体细胞数可知,乳中体细胞数显著下降,达到有效的防止隐性乳房炎的目的。
3.柑橘皮渣发酵饲料粗提溶液对黑曲霉和黄曲霉都有抑制作用,25 mL/g的供试溶液对黄曲霉和黑曲霉的抑制作用都比较强,对黄曲霉的抑制作用要强过黑曲霉的抑制作用;柑橘皮渣发酵饲料提取液对大肠杆菌和粪链球菌的活性有较强的抑制作用,对金黄色葡萄球菌有抑制作用,但抑制作用比较弱;柑橘皮渣发酵饲料提取液对粪链球菌的活性抑制作用最强;柑橘皮渣发酵饲料提取液的各个A梯度对啤酒酵母菌的无抑菌活性。
4.通过比较不同溶剂对柑橘皮渣发酵饲料抑菌活性成分提取的影响,95％乙醇和乙酸乙酯效果相当,效果皆最好,但乙酸乙酯有毒性且成本较高,所以选用95％乙醇作为提取剂。经过单因素试验发现提取时间、提取温度、料液比、乙醇浓度对柑橘皮渣发酵饲料抑菌活性物质的提取影响均较大。结合抑菌活性和实际试验,提取时间2.5h、提取温度50℃、料液比1:40、乙醇浓度80％为最好水平。通过响应面设计试验得出最佳提取工艺为:提取时间2.7h、提取温度51℃、料液比1:4乙醇浓度81％。该工艺条件下提取的粗提液对有抑菌活性的供试菌的抑菌作用有全面提高。
5.通过对柑橘皮渣发酵饲料粗提液中类黄酮化合物的鉴定得出:柑橘皮渣发酵饲料乙醇粗提液中存在类黄酮类化合物。乙酸乙酯对柑橘皮渣发酵饲料粗提液中的类黄酮类物质萃取率达到了87％。乙酸乙酯萃取的类黄酮类物质溶液对大肠杆菌、粪链球菌、黑曲霉和黄曲霉有较强的抑菌效果,而乙酸乙酯萃取后的柑橘皮渣发酵饲料粗提液则无抑菌作用。从以上的抑菌试验结果可知,起到抑菌活性物质主要是乙酸乙酯萃取的类黄酮类物。