【摘 要】
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本实验选材为十字花科植物甘蓝,在建立起再生系统后,分别以下胚轴和子叶为试验材料,所用基本培养基为MS 培养基,研究了不同外源激素配比以及不同培养条件对器官分化的影响,选
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本实验选材为十字花科植物甘蓝,在建立起再生系统后,分别以下胚轴和子叶为试验材料,所用基本培养基为MS 培养基,研究了不同外源激素配比以及不同培养条件对器官分化的影响,选出适合甘蓝生长分化的最佳培养基和培养条件。结果表明:甘蓝下胚轴诱导愈伤组织的最佳培养基为NAA 0.2 mg/L,2,4-D 0.5 mg/L;子叶诱导愈伤组织的最佳培养基为NAA 0.1 mg/L,2,4-D 0.5 mg/L;愈伤组织诱导芽分化的最佳培养基为6-BA 2 mg/L,NAA 0.1 mg/L,附加20 μm AgNO3,可提高分化率;根的诱导用的培养基为1/2 MS + NAA 0.1 mg/L. 在转化过程中,进行了几种比较试验,包括卡那霉素的筛选、抗生素浓度的筛选及不同防褐剂、不同菌浓度、共培养天数、农杆菌的不同感染时间对转化苗的影响。结果表明:AgNO3对甘蓝外植体的褐变有一定的防止作用,甘蓝外植体对卡那霉素的敏感阈值为25 mg/L,转化开始阶段不加卡那霉素,但在试验过程中要逐渐提高Km 的浓度.附加的羧苄青霉素在500 mg/L 时能完全抑制农杆菌的生长,但转化苗会逐渐产生抗性,所以在试验过程中也要逐步筛选羧苄青霉素的浓度。最后得到甘蓝抗Km 的优化组合。
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