Neuritin的组织表达分析及其相互作用因子的筛选

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:onepiece_bing
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
neuritin是1993年以色列科学家Nedivi等人,从大鼠海马齿状脑回cDNA文库中,发现的一种神经营养因子。研究发现Neuritin蛋白能促进神经突起的生长及其分支和突触的发育成熟,调节突触回路的形成;在神经系统以及神经可塑性相关的区域,neuritin表达水平较高,且神经活动和NTs均能诱导其表达,提示神经活动和NTs促进神经突起生长的作用,可能与neuritin的表达有关。 目的:本研究旨在进一步明确Neuritin蛋白的组织分布、亚细胞定位;并寻找与之相互作用的蛋白,为深入探讨其功能及作用机制奠定理论基础,并为Neuritin在神经系统疾病防治的应用提供理论依据。 方法:采用生物信息学手段,分析neuritin基因及蛋白的结构和可能的功能,并进行了基因表达串联分析(SerialAnalysisofGeneExpression,SAGE);从人类cDNA文库中扩增出neuritin的开放阅读框,用RT-PCR和免疫组织化学的方法对neuritin进行组织表达谱分析;构建pEGFP-C1-neuritin绿荧光蛋白Neuritin融合表达载体,结合免疫组织化学的方法对neuritin进行亚细胞定位;利用Gal4酵母双杂交系统,以neuritin作诱饵从人胎脑cDNA文库中,筛选与之相互作用的蛋白。 结果:1)用生物信息学手段较全面的分析了neuritin核酸及蛋白的结构和可能的功能、组织分布;2)neuritin组织表达谱分析:MTCPanel和免疫组化分析结果均显示:Neuritin蛋白在多种人体正常组织中表达,尤其在脑组织神经节细胞和肝脏中高度表达;3)Neuritin与GFP的融合蛋白,荧光定位为胞浆,与免疫组化结果一致,即Neuritin蛋白可以在胞浆分布,但不排除膜蛋白的可能。4)酵母双杂交实验:利用Gal4酵母双杂交系统,以neuritin作诱饵从人胎脑cDNA文库中,筛选得到59条与Neuritin蛋白有相互作用的蛋白质的基因,并进行了初步分类和分析。 结论:1)MTCPanel组织表达谱实验、多组织免疫组化结果以及SAGE分析均表明:Neuritin蛋白除了脑组织高度表达外,在人体心、肝、肺、小肠以及卵巢等多种正常组织也有表达,提示:Neuritin蛋白在成年期可能不仅仅在中枢神经系统发挥作用。2)通过绿荧光定位和免疫组化的结果证实:Neuritin蛋白为胞浆定位,但不排除膜蛋白的可能。3)酵母双杂交结果显示:Neuritin分别与神经相关、与肿瘤相关以及与信号转导相关的蛋白质有相互作用。提示:Neuritin蛋白可能除了与神经可塑性有关,还可能与细胞增殖以及肿瘤有关。
其他文献
环境污染,特别是水体污染是目前严重危害人类的危机之一,其中重金属污染更为突出。随着对环境重金属污染的危害、生物耐受重金属污染的细胞及分子机理、环境重金属污染的生物修复方面的深入研究发现,金属硫蛋白(Metallothionein, MT)在重金属解毒及环境污染监测和生物修复中具有极为重要的作用。MT是一类广泛存在于生物界,分子量较低(6~7 kDa),富含半胱氨酸,缺少芳香族氨基酸和组氨酸,且能与
网络视频监控系统一般包括视频采集、视频处理和视频数据传输三部分,它主要是基于计算机网络通信和嵌入式微处理器来进行的,基于ARM的嵌入式Linux操作系统是当前电子信息和计
本文调查了“环境审计”的发展,尤其涉及会计专业对服务于公共利益的责任--和对服务于公共利益的反应性.本文描述了联合国贸发会议(UNCTAD)发起国际会计学标准工作组(ISAR)为
随着移动用户数地不断增加,无线业务种类的多样化,人们希望在任何时间任何地点都能方便快捷的享受宽带业务。在这种背景下,长期演进项目(LTE)系统诞生了,它代表了蜂窝网络从3G迈向4
黄冈职业技术学院生物技术及应用专业与黄冈生物研究所按照“共建、共享、互惠、互利”的原则联合成立了黄冈食用菌试验示范产学基地,利用产学基地开展创业教育,取得了一定的
在当前经济迅速发展的大形势下,汽车保有量与日俱增,这就需要更高效的利用现有的停车位满足车主的需求,而当前停车场车位检测设备和提示设备不仅硬件成本高,耗费的软件资源大
随着科技的快速发展和量子化学这门学科的不断改进,模拟计算在材料的研究发展过程中发挥越来越关键的作用,材料计算可以预测材料的特性进而开发出新的性能优越的材料,而且还可以
阀门是流体系统中重要的控制部件。根据功能分,从最简单的止回阀到复杂的自动控制系统中所用的阀门,种类繁多。公称通径从毫米级的仪表阀到通径10m级的工业管路用阀。阀门的工
学位
植物中含有丰富的β-半乳糖苷酶,它在植物各个时期的含量对于植物的成熟、风味、颜色及采收后加工有重要意义。本论文首次从桃树中克隆出β-半乳糖苷酶基因cDNA全长序列,并