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本实验旨在对奶牛乳房炎的发病机制进行研究,通过对p38 MAPK信号通路相关因子在奶牛乳汁、血液以及组织样品的的蛋白和mRNA表达水平的测定,为p38 MAPK信号通路在奶牛乳房炎的发生过程中的功能提供实验依据。试验一:为研究奶牛乳房炎的发生与LBP,CD14相互间的关系,试验从江苏省两个大型牧场中选取41头荷斯坦奶牛,其中正常组20头,临床乳房炎组21头。分别收集各奶牛的血液样品和乳汁样品进行分析。生鲜乳中体细胞数结果表明,乳房炎组体细胞数都在50万个/ml以上,正常组奶牛的平均体细胞数均低于20万个/ml。血液样品中LPS测定结果表明,患乳房炎组LPS显著高于正常组奶牛。血清和乳清中ELISA结果表明,LBP,CD14,IL-1β和TNF-α在患临床乳房炎的奶牛中表达量极显著升高,且这几个指标中度相关,相关系数显著。实验结果表明,LBP,CD14,IL-1β和TNF-α以一种协同作用的方式参与乳腺组织对抗外界微生物的入侵。试验二:p38 MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)是真核细胞外信号传导到细胞内的四大信号转导通路之一,在炎症反应中扮演着重要的角色。为探究p38 MAPK通路在奶牛乳房炎中作用,本试验从实验一中选取正常和患临床乳房炎荷斯坦奶牛各3头进行研究。在两组奶牛的乳样,血样以及组织样中,对p38及其相关因子的表达进行比较。实验结果表明,患乳房炎奶牛乳腺组织中LBZ,CD14,p38 IL-1β和TNF-αmRNA水平表达显著升高(P<0.05)。ELISA结果表明,两组样品中LBP,CD14在炎症组血样和乳样中表达均升高,其中血清中CD14极显著升高(P<0.01),炎症组血样和乳样中炎症因子TNF-α和IL-1β均显著升高(P<0.05)。组织Western blot结果显示,临床乳房炎奶牛的组织中TLR4,p38以及p-p38的表达量与对照组相比差异显著(P<0.05)。本实验结果证明p38 MAPK信号通路相关蛋白在发生临床性乳房炎的奶牛乳腺组织中的表达量与正常奶牛的表达量的显著差异,提示了 p38 MAPK通路可能在乳房炎的发病过程中起到重要的作用。